《表1 研究基因的引物序列》

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《氧化石墨烯片层对小胶质细胞神经免疫效应的调控》


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采用含20μg·L-1 LPS或IL-4的DMEM(含2%FBS)培养基处理细胞24 h后分别继续培养6 h和8 h,每10 cm2加入1 m L Trizol裂解细胞,按照说明书提取总RNA,微量光度计测定RNA浓度。按照HiScript?ⅡQ RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)说明书对提取的总RNA进行逆转录,按照SYBR?Green Master Mix说明书对逆转录的cDNA进行扩增,按照2-ΔΔCt计算基因相对表达水平,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为内参。研究中所涉及的基因包括肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)(主要是iNOS II)、重组人精氨酸酶1(recombinant human arginase-1,Arg1)和白细胞介素10(interleukin 10,IL-10),所使用的引物序列见表1。