《表1 q PCR引物与片段长度》

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《转化生长因子β1对L929细胞增殖转分化及细胞外基质代谢的影响》


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用硫氰双胍-酚-氯仿一步抽提法(TRIzol)提取细胞总RNA,测定浓度及纯度。取1μg总RNA,按照Ta KaRa逆转录试剂盒说明书步骤进行逆转录,随后用SYBR Premix Ex Taq kit试剂盒测定各基因表达量,以GAPDH作为内参。反应条件:95℃预变性30 s,95℃变性5 s,60℃退火30 s,40个循环,完成PCR扩增。采用2-ΔΔCt法进行数据统计分析。所用引物见表1。