《表7 藜芦PCR反应体系中各因子水平》

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《藜芦ISSR-PCR反应体系的建立与优化》


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采用L16(45)正交试验,对影响ISSR-PCR扩增体系的模板DNA用量、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量、Mg2+浓度和dNTPs浓度进行5因素4水平的正交试验(表7)。共16个处理,每个处理设置3个重复。本实验选取UBC856为ISSR-PCR扩增引物。初步设定PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30 s,51.8℃退火30 s,72℃延伸30 s,循环30次,72℃延伸2 min,4℃保存。