《表4 MSAP分析所用的接头和引物序列》

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《水分胁迫下马铃薯基因组DNA甲基化水平变化分析》

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MSAP分析参考Zhao等（2008）方法。采用的接头，预扩增引物及选择性扩增引物有由上海生工公司合成（表4）。双酶切体系为：DNA（100 ng/μL）2.5μL，Eco RⅠ（10 U/μL）0.5μL，HpaⅡ/MspⅠ（10 U/μL）0.5μL，10×Buffer 2.5μL，ddH2O补足至20μL，37℃酶切3.5 h，65℃灭活10 min，置于冰上。连接体系为：上步反应酶切液20μL，E接头（10μmol/L）和H/M接头（10μmol/L）各2μL，T4 ligase（5 U/μL）0.6μL，10×T4 Buffer 3μL，ddH2O补足至30μL，4℃过夜连接。预扩增，选择性扩增及聚丙烯酰胺电泳操作参考李芳弟（2010）所述方法。扩增后的产物利用8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，银染显色后进行H（Eco RⅠ/HpaⅡ）和M（Eco RⅠ/MspⅠ）条带和带型统计分析。只记清晰条带，每个条带代表一个酶切位点，有条带记为1，无条带记为0。