《表1 CT测序引物:荧光定量PCR法检测4212例生殖道沙眼衣原体标本结果分析》

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《荧光定量PCR法检测4212例生殖道沙眼衣原体标本结果分析》


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实验步骤:(1)外套PCR扩增:反应组分为10×buffer 4μl,Mg2+3.2μl,dNTP 0.8μl,上游引物0.5μl,下游引物0.5μl,ddH2O 26.6μl,DNA 4μl,Taq酶0.4μl。反应参数:95℃,15 min;95℃,15 s,56℃,20 s,72℃,35 s,40个循环;72℃,10 min。(2)内套PCR扩增:反应组分为10×buffer 4μl,Mg2+3.2μl,dNTP 0.8μl,上游引物0.5μl,下游引物0.5μl,ddH2O 29.6μl,TAQ酶0.4μl,外套PCR产物0.5μl。反应参数:95℃,5 min;95℃,15 s,56℃,30 s,72℃,25 s,40个循环;72℃,10 min。凝胶电泳分析后进行测序。见表1。