《表1 6个靶基因的引物序列》

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《桦木脑通过SREBP1抑制靶基因PIK3R3抗肝癌》

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Hep G2细胞以106个/m L细胞密度接种于10 cm培养皿，按Magna ChIP A-17-408试剂盒说明书的步骤操作。甲醛交联组蛋白和DNA，超声打断DNA，加入SREBP-1染色质免疫沉淀抗体沉淀，蛋白G琼脂糖珠收集抗体绑定的组蛋白-DNA复合物，逆转组蛋白-DNA交联，用蛋白酶K处理和纯化DNA。Ch IP实验后，用q RT-PCR方法检测目的抗体免疫沉淀下来的DNA。根据预测结果中TFBS序列信息，选取6个位点进行CHIP-PCR验证（引物设计列表见表1）。扩增产物片段大小为80～120 bp，GC含量为40%～60%。用β-action作为内参。