《表2.蛋白同源性分析(%)》

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《莱茵衣藻E2泛素结合酶CrUBC23调控油脂积累》


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通过PCR扩增获得CrUBC23干涉片段(图3-B-a),插入p MD18-T,分别用HindⅢ/Bam HⅠ和XbaⅠ/SalⅠ双酶切获得正反向干涉片段(图3-B-b),依次插入T282载体,获得中间载体,Eco RⅠ酶切中间载体获得含有CrUBC23正反向结构的片段,插入pMaa7IR/XIR(图3-A),Eco RⅠ酶切显示,pMaa7IR/CrUBC23IR构建成功(图3-B-d)。全长基因插入pCAMBIA1302 NcoⅠ和SpeⅠ酶切位点,得到过量表达载体pC-CrUBC23。玻璃珠法转化莱茵衣藻CC425(图3-C),挑取单克隆提取转基因藻株基因组DNA,进行PCR检测,结果显示pMaa7IR/CrUBC23IR(图3-D-d)和pC-CrUBC23(图3-D-e)已经成功整合到莱茵衣藻CC425基因组DNA上,Cr UBC23 RNAi和过量表达藻株构建成功。