《表1 引物探针信息表：转基因玉米MIR604基体标准物质研制》

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《转基因玉米MIR604基体标准物质研制》

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转基因玉米种子的基因型与其转基因含量密切相关，根据MIR604转化体的分子特征，在插入位点的两侧基因组序列上分别设计1条引物（MIR604GF/MIR604GR），在插入位点处设计1条探针（MIR604GP）（图1），序列见表1。将插入位点特异性引物探针组合MIR604GF/R/P与MIR604转化体特异性引物探针MIR604F/R/P组合使用，鉴定转基因玉米MIR604种子的基因型。对于纯合种子，2条染色体上均含有外源插入序列，只有引物探针组合MIR604F/R/P有典型扩增曲线，而引物探针组合MIR604GF/R/P无扩增曲线；对于杂合种子，一条染色体上有插入序列，另一条染色体上没有，2个引物探针组合均有典型扩增曲线。对于阴性植株，因不含有外源插入序列，只有引物探针组合MIR604GF/R/P有典型扩增曲线（图1）。将单粒提取的基因组DNA作为PCR的模板，用MIR604转化体、插入位点和Adh1内标基因3个引物/探针组合同时进行PCR扩增。扩增结果显示，240粒种子的单粒DNA中3个引物/探针组合均有典型扩增曲线（图2），表明原材料MIR604种子均为杂合种子。