《表1 miR-SNPs基因分型的引物和探针》

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《MicroRNA生物合成相关蛋白基因SNP与结直肠癌患者预后关系》

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使用基因组DNA纯化试剂盒（美国Promega公司）提取基因组DNA样本，后置于-20℃恒温冰箱中保存。通过互联网在NCBI SNP(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/snp/）数据库查询6个miRNA生物合成蛋白基因SNP位点所对应的目的基因，设计引物（表1）。应用聚合酶链反应-连接酶反应（polymerase chain reaction-1igase detection reaction，PCR-LDR）对miR-SNPs进行基因分型，使用PCR预混合试剂盒（美国Promega公司）进行目的基因扩增，将其与miR-SNPs相匹配的不同探针进行连接（表1），用ABI-PRISM 3730XL基因分析仪（Applied Biosystems，CA，USA）对连接产物进行分离，根据其长度不同而区分多态性，进行基因分型。