《表1 HIV-1 DNA TaqMan-MGB荧光探针PCR的引物与探针》

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《HIV感染者外周血单个核细胞中HIVDNA载量与HIVRNA及CD4~+T淋巴细胞间的关系》

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取病人清晨空腹静脉血3管，采集2m LEDTA抗凝静脉血2管和5m L无添加抗凝剂静脉血1管。其中1管EDTA抗凝血用于T淋巴细胞亚群分类检测，另1管EDTA抗凝血用于HIV-1 DNA检测，无添加抗凝剂血则用于HIV-1 RNA载量的检测；CD4细胞亚群计数：采用美国贝克曼库尔特FC500流式细胞仪及配套试剂。HIV-1 RNA病毒载量检测：采用美国ABI公司Step One Plus荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪，试剂盒为广州中山大学达安基因股份有限公司生产HIV-1 RNA实时荧光定量检测试剂盒，试剂盒检出下限为50IU/mL。HIV-1 DNA载量检测：采用实验室构建的反应体系PCR mix 12μL（Buffer，Mg2+，dNTP），1.5UTaq酶1μL，0.5umol/L的上游引物、下游引物各0.5μL，0.1umol/L的荧光探针1μL，ddH2O 8μL，模板2μL，合计25μL。扩增程序为:激活UNG酶37℃5 min，预变性95℃5 min，扩增95℃15 s，58℃45 s运行55个循环，检出下限为50IU/mL。引物探针委托上海生工生物科技有限公司合成纯化，引物探针见表1，其他原料购自广州蓝博生物技术公司。所有实验室检测均有专业人员按照试剂盒说明书或SOP进行。