《表1 引物序列:阿魏酸对2型糖尿病小鼠心肌损伤的影响》

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《阿魏酸对2型糖尿病小鼠心肌损伤的影响》


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采用Trizol一步法从心脏组织中提取总RNA,采用反转录试剂盒反转录为cDNA,取反转录产物2μL作为模板,应用Q-PCR仪进行扩增。TLR-4、NF-?B和NALP3部分片段的引物采用Premier 5.0软件进行设计,引物序列见表1。反应条件如下:95℃预变性5 min;95℃变性30s,60℃退火30 s,72℃延伸60 s共40个循环,最后72℃延伸10 min,-20℃保存,以GAPDH为内参,每组样本设置3个复孔,采用2-ΔΔCt法表示TLR-4、NF-?B、NALP3 m RNA相对表达量,实验重复3次后进行统计分析。