《表5 ddPCR定量检测转基因玉米Bt11方法的线性范围》

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《基于双重微滴数字PCR对转基因玉米Bt11品系定量检测》

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*:RSD≤25%时转基因玉米Bt11品系内源和外源基因每微升的最低拷贝数

以转基因玉米Bt11品系不同浓度的DNA作为模板进行ddPCR定量检测。从表5可见，在RSD≤25%时，模板DNA最小浓度为0.05 ng/μL（DNA用量为0.1 ng），玉米内源基因Zein可定量到9个拷贝（20μL体系），转基因玉米Bt11品系特异性序列可定量到5个拷贝（20μL体系）。以模板DNA浓度为横坐标、每微升靶标序列拷贝数为纵坐标，分别绘制内源基因Zein和Bt11品系特异性基因的线性图，发现模板DNA浓度在0.05～10 ng/μL范围内，Zein及Bt11特异性基因的拷贝数与样品浓度呈线性关系，相关系数达到0.999（图2）。上述结果表明，本研究建立的ddPCR方法具有良好的线性相关性，可用于转基因玉米Bt11品系特异性基因和内源基因Zein的拷贝数定量检测。