《表2 A群RV一步法RT-ddPCR检测方法的定量限和准确度》

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《A群轮状病毒一步法RT-ddPCR方法的建立》


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注:NoCall.样品中病毒模板载量超过ddPCR检测范围。—.该浓度梯度没有可接受的检测结果,不能计算该参数。

将制备的A群RV RNA标准物质分别按稀释倍数102、103、104、105、106、2×106、4×106和107稀释,每个稀释倍数的理论浓度分别为580 000.00、58 000.00、5 800.00、580.00、58.00、29.00、14.50、5.80拷贝/μL。结果表明,理论浓度为580 000.00拷贝/μL的溶液超过了一步法RT-ddPCR的检测范围,其他稀释梯度的检测相对标准偏差(relative?standard?deviation,RSD)为3.6%~16.0%,且理论浓度与检测浓度之间呈线性关系,方程:Y=1.029X-11.444,R2=0.998 7,P<0.000 1,说明A群RV一步法RT-ddPCR检测方法可准确定量检测A群RV RNA浓度(表2,图5)。当A群RV RNA标准物质稀释至5拷贝/μL左右时,理论值与检测体系检测的实际值仍然接近,4次重复的RSD均小于25%,表明该检测体系定量限可达5拷贝/μL。