《表4 IL-35定量ELISA检测方法的添加回收率(准确度)》

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《人IL-35单克隆抗体制备及其在定量ELISA检测方法中的应用》

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按照灵敏度的测定方法，我们测定了20个空白样品即样品稀释液的OD450值，测定的平均值加上2倍标准差所得的值为0.174，代入回归方程，计算出最低检测下限为1.26 pg/mL。同时，以重组1L-12p35、重组IL-27EBI3、IL-12、IL-23、IL-27以及2个非IL-12家族细胞因子IL-6、IL-10作为待检物对该检测方法的特异性进行了评定，结果表明该检测方法与IL-12家族成员1L-12p35、IL-27EBI3、IL-12、IL-23、IL-27的交叉反应率均为0.1%，与IL-6和IL-10的交叉反应率为0.1%。最后，我们对该检测方法的精密度（重复性）和准确度进行了评定，用该方法对高（200 pg/mL）、中（50 pg/mL）、低（5 pg/mL）)浓度的IL-35进行分批多次检测，计算了测定的批内差和批间差，结果见表3，批内RSD为5.1%–5.6%，批间RSD为5.6%–7.2%，完全可以满足生物样品中IL-35的快速定量检测。用添加回收率作为准确性的评定指标，对终浓度为高（123.6 pg/mL）、中（43.6 pg/mL）、低（13.6 pg/mL）的IL-35添加品进行检测，计算出该检测方法的添加回收率（表4）分别为103%、90%及92%。以上实验结果表明，该检测方法的各项指标都达到了定量分析的要求。