《表1 TNF-α基因引物序列》

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《肿瘤坏死因子-α基因多态性与肝细胞癌遗传易感性的关联研究》

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SNP位点-238G/A和-308A/G的基因分型采用TaqMan探针荧光定量PCR方法进行检测，所使用的仪器为罗氏LightCy-cler480实时荧光定量PCR仪，基因分型试剂、TaqMan探针以及引物均购自美国ABI公司。PCR反应在罗氏LightCycler480实时荧光定量PCR仪进行，反应体积为10μl，反应条件为95℃预变性10 min，92℃变性15 s、60℃退火1 min，共40个循环，40℃延伸5 min。以水代替模板DNA作为阴性对照。用罗氏LightCycler 480荧光定量分析软件LCS480 1.5.1.62对实验数据进行基因分型，随机对SNP位点的不同基因型样本进行测序，验证Taqman基因分型的结果。SNP位点扩增引物设计参照文献，所用引物见表1。