《表1 PCR反应体系引物序列》

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《Glt25d1基因敲低对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠巨噬细胞和中性粒细胞的影响》


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注:GAPDH为甘油醛-3-磷酸脱氢酶,MCP-Ⅰ为单核巨噬细胞趋化蛋白1,MIP-Ⅰα为巨噬细胞炎性蛋白1α,MIP-Ⅱ为巨噬细胞炎性蛋白2,Ly6G为淋巴细胞抗原6

(quantita-tive reverse transcriptase-mediated PCR,qRT-PCR)采用Trizol总RNA提取试剂法提取肝组织RNA,经逆转录后于-80℃保存。qRT-PCR体系及反应条件严格按照Promega厂家说明书进行。使用A B I 7 5 0 0型实时荧光定量P C R仪检测,得到C t值。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH),通过2-ΔΔCt法计算单核巨噬细胞趋化蛋白1(monocyte/macrophage chemotaxis proteinⅠ,MCP-Ⅰ)、巨噬细胞炎性蛋白Ⅰα(macrophage inflammatory proteinⅠα,MIP-Ⅰα)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory proteinⅡ,MIP-Ⅱ)及淋巴细胞抗原6(lymphocyte antigen 6 complex locus G,Ly6G)mRNA的相对表达量。引物序列见表1。