《表1 套式PCR引物序列》

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《上海市警犬寄生蜱种鉴定及其携带的原虫及微生物组分析》

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为了检测蜱所携带的原虫，以蜱DNA为模板，扩增巴贝斯虫的引物为Bab1-F/Bab1-R和Bab2-F/Bab2-R，扩增泰勒虫引物为BT1-F/BTH1-R和BT1-F/BT1-R，均采用套式PCR，引物序列见表1。反应体系：r Taq酶25μL，上游引物3μL，下游引物3μL，ddH2O 17μL，DNA模板2μL。巴贝斯虫PCR反应条件：94℃预变性3 min，35个循环（94℃变性45 s，56℃退火35s，72℃延伸1 min)，72℃延长15 min。泰勒虫第一轮PCR反应条件：94℃预变性10 min，30个循环（95℃变性45 s，65℃退火加延伸90 s)，72℃延长10 min；第二轮PCR反应条件：94℃预变性10 min，30个循环（95℃变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s)，72℃延长10 min。