《表3 重叠PCR扩增体系》

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《利用重组大肠杆菌发酵生产L-茶氨酸》


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以T7-gmas基因整合为例。根据GenBank中E.coli W3110的yghX基因序列、T7启动子和Methylovorus mays的gmas序列,在Primer Premier 5.0中设计引物,分别扩增上游同源臂、下游同源臂和中间整合片段。其中相连片段分别有约20 bp的重叠区域。PCR扩增体系如表3所示。