《表1 实验相关引物:AEP环化酶的高效原核诱导表达与活性检测体系的建立》

《表1 实验相关引物:AEP环化酶的高效原核诱导表达与活性检测体系的建立》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《AEP环化酶的高效原核诱导表达与活性检测体系的建立》


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AEP基因序列合成自生工生物工程(上海)股份有限公司,并作为DNA模板,利用AEP-F/AEP-R(表1)引物对进行扩增,对PCR产物进行切胶回收.用XhoI和NcoI对pET28a载体进行双酶切,切胶回收线性化载体DNA,利用T5核酸外切酶介导的TEDA方法[16]将AEP片段插入到酶切后的p ET28a载体中.然后将酶连产物转化到大肠杆菌Gold感受态细胞中,待37℃过夜培养后,通过菌落PCR筛选并进行测序验证得到正确的重组质粒p ET-28a-AEP.