《表1 引物种类及其序列：PDE4D在哮喘患儿和哮喘模型的表达差异》

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《PDE4D在哮喘患儿和哮喘模型的表达差异》

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组织取50 mg左右研磨成粉或收细胞，加1 mL TRIzol，冰上裂解5 min，加200μL氯仿，震荡混匀后静置5 min，4℃下12 000 r/min离心15 min，收集上清液至新离心管中，加500μL异丙醇，室温静置10 min，4℃下12 000 r/min离心10 min，去上清后用1 mL75%乙醇清洗沉淀，4℃下7 500 r/min离心5 min，吸去上清，室温下风干后用20μL无核酶水稀释。用超微量分光光度计检测RNA浓度，以500 ng/μL逆转。SYBR Green RT-PCR反应体系检测基因表达水平。所用引物种类及其序列见表1。相对表达量采用2-ΔΔCT法计算。