《表2 16S rRNA和gyr A基因序列PCR扩增体系》

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16S rRNA基因序列扩增引物:上游引物27F（5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’），下游引物1492R（5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’）；gyrA基因序列PCR扩增引物:上游引物BS-gyrA-F（5’-CAGT-CAGGAAATGCGTACGTCTT-3’），下游引物BS-gyrA-R（5’-CAAGGTAATGCTCCAGGCATTGCT-3’）。16S rRNA基因和gyrA基因的扩增条件均为94℃，5min；（94℃，1 min，55℃，1 min，72℃，1.5 min，35个循环）；72℃，10 min。扩增体系见表2。扩增完成后，取10μL PCR产物点样1.0%琼脂糖凝胶电泳来确认PCR产物质量。扩增产物由北京诺赛基因组研究中心有限公司测序。