《表4 试验所用SSR引物》

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《35份重庆大茶树种质资源遗传多样性的SSR分析》

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利用开发及筛选的21对引物（表4）对35份供试样品的DNA进行扩增。PCR反应体系为15μL，模板DNA（1.5μL）、引物（上下游引物各1.5μL）、dNTP（0.4μL）、Taq DNA聚合酶（0.2μL）、10×PCR反应缓冲液（2μL）、Mg Cl2（1.2μL）、ddH2O（6.7μL）。设定扩增程序如下：94℃预变性5 min，94℃变性30 s、最适温度（56℃）退火30 s、72℃延伸45 s，30个循环，最后72℃延伸6 min。扩增好的产物在-4℃条件下保存，并在24 h内用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，电泳进行时的电压为110 V，时间为45 min。电泳结束后参照Charters和Wilkinson（2000）的方法进行显色，使用凝胶成像仪拍照记录。