《表1 试验所用PCR引物》

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《杜氏盐藻β-酮酯酰-ACP合酶(DsKASⅡ)基因的分离及功能分析》


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用Primer 6.0对DsKASII基因设计定量PCR引物DsKASII-F/R,采用杜氏盐藻的DsActin作为内参基因[21](表1)。半定量RT-PCR检测DsKASII基因表达量,PCR反应程序:95℃5 min,25个循环(95℃30 s,58℃30 s,72℃30 s)后,72℃10 min。将PCR产物进行琼脂糖凝胶(1%)电泳检测。同时应用实时荧光定量PCR(ABM公司试剂盒)检测Ds KASII基因表达量,反应程序:95℃10 min,95℃15 s,60℃30 s,40个循环。以内参(Actin)作为对照,使用Excel和SPSS处理相对表达量并绘制柱形图。