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第一章 体外DNA重组技术的酶学1

1·1限制性核酸内切酶1

1·2用DNA连接酶连接限制性酶切片段2

目 录5

引言5

1·3通过同聚物的尾端连接DNA9

第二章质粒运载体13

2·1 pSC10113

2·2 ColE114

2·3带有抗药性标志的ColE1衍生质粒15

2·4质粒运载体系统的生物防护20

2·5含有特异核苷酸顺序的质粒的筛选22

第三章λ噬菌体运载体25

3·1 λ噬菌体的生物学25

3·2噬菌体运载体28

3·3晚期基因——它们在克隆运载体中的应用33

3·3·1噬菌体装配33

3·3·2生物防护35

3·3·3利用体外包装法提高重组体的回收率36

第四章克隆DNA在大肠杆菌中的表达40

4·1用质粒运载体克隆DNA的表达40

4·1·1大肠杆菌营养缺陷型的互补作用40

4·1·2新生多肽表达的检测41

4·1·3脊椎动物基因在大肠杆菌中的表达43

4·2λ噬菌体启动基因的表达52

第五章 高等真核生物染色体DNA克隆片段的物理56

鉴定法56

5·1克隆的DNA在其染色体源出点上作图56

5·1·1原位杂交56

5·1·2体细胞杂交60

5·2电泳图谱技术60

5·2·1限制性酶切图谱60

5·2·2凝胶转移杂交法63

5·2·3转录体的图谱66

5·3用电镜作克隆DNA的图谱68

5·3·1变性图谱69

5·3·2异源双链图谱70

5·3·3 RNA同源区的图谱71

第六章真核系统基因表达的研究途径80

6·1离体变异80

6·2表达系统82

6·2·1酵母中的克隆82

6·2·2用猿猴病毒40作克隆运载体85

6·2·3哺乳动物细胞的直接转化90

6·2·4克隆DNA进入爪蟾卵母细胞的微91

量注射法91