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前言页1

第1篇总论3

第1章 绪论3

第1节 定义3

第2节 病毒性肝炎实验诊断学的研究范围4

第3节 病毒性肝炎实验诊断学的研究方向9

附：肝炎病毒及其实验研究大事记12

第2章 肝炎病毒的生物学特性和分子生物学15

第1节 甲型肝炎病毒的生物学特性和分子生物学15

一、甲型肝炎病毒的形态、结构与理化性质15

二、甲型肝炎病毒的分离培养及动物模型16

三、甲型肝炎病毒的抗原性及变异17

四、甲型肝炎病毒的分子生物学17

第2节 乙型肝炎病毒的生物学特性和分子生物学22

一、乙型肝炎病毒的发现及形态结构特征22

二、乙型肝炎病毒的理化特性及抵抗力22

三、乙型肝炎病毒的动物模型与组织培养22

四、乙型肝炎病毒抗原的主要特点23

五、乙型肝炎病毒基因组结构与功能24

六、乙型肝炎病毒基因的转录与调控25

七、乙型肝炎病毒DNA的复制26

八、乙型肝炎病毒的变异27

第3节 丙型肝炎病毒的生物学特性和分子生物学29

一、丙型肝炎病毒的生物学特性30

二、丙型肝炎病毒的分子生物学31

三、丙型肝炎病毒序列的多样性及分型35

第4节 丁型肝炎病毒的生物学特性和分子生物学39

一、丁型肝炎病毒的生物学特性40

二、丁型肝炎病毒的分子生物学42

第5节 戊型肝炎病毒的生物学特性和分子生物学51

一、概述51

二、戊型肝炎病毒的分类学52

三、杯状病毒的基因结构和转录特点52

六、戊型肝炎病毒感染的诊断53

五、戊型肝炎病毒分子流行病学53

四、戊型肝炎病毒的基因转录及蛋白质合成53

七、戊型肝炎疫苗研制的必要性和最新进展54

第6节 庚型肝炎病毒的生物学特性和分子生物学54

一、GB肝炎因子55

二、庚型肝炎病毒HGV/GBV-C的发现56

三、庚型肝炎病毒的基因型和生物学57

四、庚型肝炎病毒的分子生物学57

五、庚型肝炎病毒基因组与其它肝炎病毒基因组的比较65

第3章 肝炎病毒的分子生态学69

第1节 分子生态学的基本概念69

一、生态学的基本概念69

二、微生物生态学的基本法则70

三、分子生物学的法则及分子生态学71

第2节 HBV的分子生态学72

一、HBV的组织培养和动物模型72

二、肝炎病毒分子生态学中受体的研究73

三、肝炎病毒变异型的分子环境是分子生态学研究的重要内容之一73

四、乙型肝炎病毒致癌和病毒性肝炎在治疗上的分子生态学实例74

五、乙型肝炎病毒亚型的分子生态学75

第3节 HCV的分子生态学76

一、HCV的变异性和HCV分子生态学的任务76

三、HCV在PBMC栖息以及在非癌组织中逃避免疫反应的分子生态学77

二、HCV基因型别与HCV病毒血症的分子生态学77

四、铁在治疗慢性病毒性肝炎中的作用78

第4节 HDV的分子生态学78

第4章 肝炎病毒的致病性及免疫性81

第1节 HAV致病性及免疫性81

一、体内感染过程81

二、发病机制81

三、免疫性及预后83

第2节 HBV致病性及免疫性84

一、体内感染过程及免疫应答84

二、发病机制88

第3节 HCV致病性及免疫性89

一、体内感染过程及免疫应答89

三、预后89

二、发病机制92

三、HCV感染的预后94

第4节 HDV致病性及免疫性95

一、体内感染过程95

二、发病机制95

三、HDV感染的预后96

第5节 HEV致病性及免疫性97

第5章 病毒性肝炎的流行病学100

第1节 历史回顾100

一、甲型肝炎病毒和乙型肝炎病毒100

二、非甲非乙型肝炎病毒101

第2节 甲型肝炎的流行病学102

一、甲型肝炎病毒对物理化学因子的抵抗力102

二、甲型肝炎的传染源102

三、甲型肝炎的传播途径及流行特征103

四、甲型肝炎的预防104

第3节 乙型肝炎的流行病学105

一、乙型肝炎病毒的宿主及临床感染过程105

二、乙型肝炎病毒的传播途径及方式106

三、乙型病毒性肝炎的流行特征107

第4节 丙型肝炎的流行病学110

一、丙型肝炎病毒感染的一般状况110

二、丙型肝炎的自然感染史111

四、丙型肝炎传播的危险因素112

三、丙型肝炎在各类临床型肝炎中的发病比例112

五、HCV的基因型115

六、丙型肝炎的预防115

第5节 丁型肝炎的流行病学115

第6节 戊型肝炎的流行病学116

一、戊型肝炎病毒的生物学特性及实验研究116

二、戊型肝炎的传染源及传播途径116

三、戊型肝炎的流行特征117

四、散发性急性肝炎病例中戊型肝炎所占比例118

五、戊型肝炎在人群中的流行状况118

第7节 庚型肝炎的流行病学119

一、病毒性肝炎的一般预防方法133

第6章 病毒性肝炎的防治原则133

第1节 病毒性肝炎的预防133

二、病毒性肝炎的免疫预防135

三、病毒性肝炎的消毒方法137

第2节 病毒性肝炎的治疗138

一、病毒性肝炎的一般治疗原则138

二、治疗病毒性肝炎的药物简介140

第3节 病毒性肝炎的诊断标准152

一、临床诊断152

二、病原学诊断155

一、抗肝炎药物临床研究指导原则156

三、病理组织学诊断156

第4节 抗肝炎药物的临床研究156

二、抗肝炎药物临床研究及药效评价应注意的问题157

第7章 电子显微镜技术在病毒性肝炎诊断和研究上的应用160

第1节 电镜技术在甲型病毒性肝炎诊断和研究上的应用160

一、概述160

二、诊断和研究材料的来源及处理161

三、电镜检查方法162

第2节 电镜技术在乙型病毒性肝炎诊断和研究上的应用165

一、概述165

三、快速胶体金免疫电镜技术检测HBV及其意义166

二、快速免疫电镜检测及其意义166

四、HBeAg的免疫电镜鉴定167

五、HBcAg颗料和HBV DNA的电镜观察168

六、HBsAg的电镜观察170

七、鸭乙型肝炎的电镜研究171

八、HBV DNA转染培养细胞的电镜研究171

第3节 电镜技术在丙型病毒性肝炎诊断和研究上的应用173

一、概述173

二、HCV免疫电镜研究173

三、HCV感染肝组织及体外培养细胞的电镜观察174

四、丙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）HCV感染的电镜研究176

一、概述179

二、HDV的电镜及免疫电镜检测179

第4节 电镜技术在丁型病毒性肝炎诊断和研究上的应用179

三、HDV与HBV协同感染培养细胞的电镜研究180

第5节 电镜技术在戊型病毒性肝炎诊断和研究上的应用180

一、概述180

二、HEV的IEM检测181

三、HEV归科的形态学研究181

第6节 新发现的肝炎病毒电镜研究进展182

一、己型肝炎病毒的电镜检查182

二、庚型肝炎病毒的电镜检查183

第1节 原理185

一、离心机的一般原理185

第8章 密度梯度离心法及其在肝炎病毒诊断和研究中的应用185

二、超离心的方法及其选择188

第2节 仪器、设备及操作190

一、离心机190

二、转子190

三、制备超离心的操作191

第3节 密度梯度离心法在肝炎病毒诊断和研究中的应用197

一、密度梯度离心法纯化乙型肝炎病毒197

二、密度梯度离心法纯化乙型肝炎核心抗原（HBcAg）201

第9章 单克隆抗体和基因工程抗体技术在病毒性肝炎诊断中的应用204

第1节 抗甲型肝炎病毒的单克隆抗体204

二、免疫动物205

三、细胞的融合和克隆205

一、免疫原（HAV）的提取205

四、抗-HAV单克隆抗体的生产与纯化206

五、抗-HAV单克隆抗体的检定207

六、甲型肝炎病毒单克隆抗体的应用207

第2节 乙型肝炎病毒单克隆抗体及其在诊断中的应用208

一、HBsAg单克隆抗体的制备及应用208

二、HBcAg单克隆抗体的制备及应用214

三、HBeAg单克隆抗体的制备及应用215

第3节 单克隆抗体在丙型肝炎感染诊断的应用216

一、抗-HCV单克隆抗体研究现状216

二、抗原检测中的应用216

一、人-鼠嵌合抗体218

第4 节 基因工程抗体的研究与应用218

二、改形抗体或人源化抗体220

三、小分子抗体220

四、噬菌体抗体库221

第10章 基因工程技术在肝炎病毒上的应用224

第1 节 肝炎病毒基因组的克隆224

一、乙型肝炎病毒基因组的克隆224

二、甲型肝炎病毒基因组的克隆225

三、丙型肝炎病毒基因组的克隆225

四、肝炎病毒基因组克隆技术的新进展226

第2节 肝炎病毒基因组的序列分析226

一、测定DNA序列的方法226

一、大肠杆菌表达系统227

第3节 肝炎病毒基因的表达227

二、肝炎病毒基因组的结构分析227

三、肝炎病毒基因组的变异227

二、酵母表达系统228

三、哺乳动物细胞表达系统229

四、痘苗病毒表达系统229

五、昆虫表达系统230

第4节 基因工程肝炎疫苗的研制231

一、基因工程乙型肝炎疫苗231

二、基因工程甲型肝炎疫苗231

三、基因工程丙型肝炎疫苗232

四、基因工程戊型肝炎疫苗232

五、疫苗发展的新途径232

二、基因表达产物的应用233

第5节 基因工程技术在病毒性肝炎诊断中的应用233

一、基因诊断技术233

第11章 病毒性肝炎的基因诊断技术234

第1节 PCR技术检测甲型肝炎病毒235

一、概述235

二、粪便悬液或其他液相悬液中病毒核酸的RT-PCR扩增235

三、含有HAV的血清标本的PCR扩增236

第2节 PCR检测慢性HBV感染的临床意义236

一、PCR方法和评价237

二、PCR检测HBV携带者的HBV DNA238

三、PCR检测肝组织和外周血单核细胞（PBMC）中的HBV DNA239

四、PCR分析HBV基因的异质性240

一、用PCR扩增试验鉴定HCV引起的肝病241

第3节 PCR技术在HCV肝病中的应用241

二、肝细胞肝癌中HCV感染的RNA正链和负链病毒的检测245

三、用5 -非翻译区探针直接狭线杂交（direct slot hyhridization）检测血清中HCV RNA247

第4节 基因诊断技术249

一、用PCR诊断病毒血症的有关问题249

二、病毒核酸定量测定250

三、原位杂交试验（ISH）254

四、肝炎病毒序列多样性分析技术254

五、基因诊断技术的临床应用258

六、结束语260

一、抗原265

二、抗体265

第2篇肝炎病毒及其标志物的检验265

第1节 抗原抗体反应265

第12章 免疫学检验基础265

三、抗原抗体反应266

第2 节 检验方法基础267

一、抗体的产生267

二、抗原的制备267

三、试验的类型268

四、标记的免疫技术268

二、方法模式269

第3节 固相酶免疫测定269

一、基本原理269

三、试剂类型272

四、操作方法274

五、检测仪器275

六、膜载体的酶免疫测定277

第4节 放射免疫测定278

第5节 间接血凝试验279

第6节 快速斑点免疫结合试验280

一、金标记结合物280

二、斑点金免疫渗滤试验282

三、斑点免疫层析试验283

四、在传染病诊断中的应用284

第13章 分子生物学检测技术基础285

第1节 基因诊断的基本理论285

一、基因诊断的定义及特点285

二、基因、基因的结构与基因突变286

第2节 基因探针技术289

一、何谓基因探针289

二、基因探针分类289

三、基因DNA探针片段的制备289

四、基因探针的标记290

第3节 Southern印迹杂交291

第4节 Northern 印迹杂交293

第5节 聚合酶链反应294

一、基本原理和操作方法295

二、PCR试剂的制备296

三、PCR反应条件的选择和优化297

四、逆转录PCR298

五、PCR扩增产物的分析298

六、PCR技术的注意事项299

第14章 肝炎病毒及其标志物检验的诊断用品和质量控制302

第1节 简介302

二、甲肝病毒抗原检测303

三、抗-HAV IgM检测303

一、甲肝病毒RNA检测303

第2节 甲型肝炎病毒标志物的诊断用品和标准品303

四、抗-HAV总抗体测定304

五、国家对甲型肝炎病毒诊断试剂的管理及参考品304

第3节 乙型肝炎病毒标志物的诊断用品和标准品305

一、乙型肝炎诊断试剂简介305

二、各种乙型肝炎诊断试剂及其方法305

三、国家质控参考品和标准306

四、乙型肝炎诊断试剂质量检定情况308

第4 节 丙型肝炎病毒及其标志物的诊断用品和标准品309

一、简介309

三、HCV基因及抗原的检测310

二、抗-HCV抗体的检测310

四、我国丙肝诊断试剂的现状及质量控制311

第5节 丁型肝炎病毒标志物的诊断用品和标准品312

第6节 戊型及庚型肝炎病毒标志物的诊断用品和标准品313

一、戊型肝炎病毒诊断用品313

二、庚型肝炎病毒诊断试剂初步研究314

一、适用范围315

二、依据和目的315

三、定义315

第1节 实验室质量管理315

第15章 肝炎病毒检测的质量保证315

四、建立质量体系316

第2节 临床免疫实验室室内质量控制321

一、名词定义321

二、开展室内质控前的准备工作322

三、室内质控步骤323

第3节 临床免疫学检验室间质量评价332

一、临床免疫学检验室间质量评价的发展332

二、名词定义333

三、标准334

四、室间质评的方式334

六、预期结果的确立336

五、室间质评的评分336

七、部中心组织的肝炎病毒标志物检验的室间质评337

第16章 病毒性肝炎检验标本的收集、运送和处理344

第1节 概述344

一、标本来源344

二、常见标本的收集、运送和保存345

第2节 病毒性肝炎标本收集、运送和保存的一般原则347

一、HAV标本的收集、运送和保存347

二、HBV和HDV标本的加工及其职业安全准则347

三、HCV标本的收集348

四、HEV标本的收集和运送349

第1 节 概述350

第17章 甲型肝炎病毒及其抗原、抗体的检测350

第2节 甲型肝炎病毒的检测351

一、cDNA-RNA分子杂交法检测甲型肝炎病毒351

二、抗原捕捉聚合酶链反应（AC-PCR）353

第3节 酶免疫法定量检测抗-HAV355

第4 节 ELISA检测抗-HAV IgM357

第5 节 ELISA检测抗-HAV361

第18章 乙型肝炎表面抗原和抗体的检测364

第1节 全血凝集法检测HBsAg364

第2节 反向被动血凝法检测HBsAg365

第3节 被动血凝法检测抗-HBs367

第4节 放射免疫（RIA）检测HBsAg370

一、双抗体夹心法检测HBsAg372

第5节 酶联免疫吸附试验检测HBsAg、抗-HBs372

二、EIA一步法检测HBsAg374

三、EIA快速法检测HBsAg375

四、MEIA法检测HBsAg、抗- HBs376

五、微粒子化学发光免疫技术检测HBsAg、抗-HBs377

六、斑点膜法检测HBsAg379

七、EIA法检测抗-HBs380

第6节 HBsAg亚型的检测382

第7节 免疫层析试验检测HBsAg、抗-HBs388

第19章 乙型肝炎e抗原和e抗体的检验392

第1节 概述392

第2节 酶联免疫法检测HBeAg、抗-HBe393

一、EIA法检测HBeAg、抗-HBe394

二、EIA快速法检测HBeAg396

三、EIA快速法检测抗-HBe397

第3节 放射免疫法检测HBeAg、抗-HBe397

一、RIA法检测HBeAg397

二、RIA法检测抗-HBe398

第20章 乙型肝炎病毒pres1、抗-pres1，pres2、抗-pres2的检测400

第1 节 乙型肝炎病毒pres1的检测400

第2节 乙型肝炎病毒抗-pres1的检测401

第3节 pres2抗原的检测403

第4节 抗-pres2抗体的检测405

第5节 血凝法检测血清聚合白蛋白受体408

第21章 乙型肝炎核心抗原和抗体的检验410

第1节 免疫吸附血凝试验检测核心抗原410

第2节 ELISA法直接检测血清HBcAg410

第3节 放射免疫法检验HBcAg413

第4节 乙型肝炎病毒核心抗体的检测（抗-HBc IgM）415

第5节 EIA夹心法检测抗-HBc IgM416

第6节 放射免疫法检测抗-HBc IgM417

第7节 临床意义418

一、HBcAg418

二、抗-HBc IgG、IgM419

一、3H掺入法检测DNAP424

第1节 HBV DNA多聚酶的检测424

第22章 乙型肝炎病毒DNA多聚酶及HBV DNA测定424

二、特异性免疫沉淀法检测血清中DNAP425

三、微量法检测DNAP426

第2节 Dane颗粒抗体检测429

第3节 分子杂交测HBV DNA430

一、概述430

二、班点分子杂交检测HBV DNA431

第4节 聚合酶链反应检测HBV DNA436

一、快速PCR法检测HBV DNA437

二、套式PCR检测HBV DNA439

三、免疫PCR检测血清HBV DNA440

四、免疫套式PCR检测HBV DNA441

五、二合一PCR检测HBV DNA，HCV RNA442

第5节 HBV DNA序列分析445

第23章 丙型肝炎病毒及其抗原抗体的检验450

第1节 概述450

一、丙型肝炎病毒及其抗原抗体检验试剂的发展450

二、HCV RNA的检测453

第2节 抗-HCV IgG检测454

一、EIA检测抗-HCV IgG454

二、RIBA检测抗-HCV IgG456

第3节 PCR检测HCV RNA460

第4节 抗-HCV IgM检测463

第5节 HCV RNA的定量测定466

第6节 HCV的基因分型468

第24章 丁型肝炎病毒及其抗原和抗体的检验476

第1节 HDV的实验动物模型476

第2节 HDV抗原和抗体的制备477

一、HDAg的提取和纯化477

二、抗-HD的纯化478

三、辣根过氧化物酶（HRP）标记抗-HD478

第3节 抗-HD和抗-HD IgM的检测479

一、酶联免疫法（ELISA）检测抗-HD479

二、放射免疫法（PIA）测定抗-HD480

三、酶联免疫法（ELISA）检测抗-HDIgM481

一、ELISA检测HDAg482

第4节 HDAg的检测482

二、RIA测定HDAg483

三、免疫酶标定位法测定HDAg483

第5节 HDV RNA的检测484

一、核酸分子杂交法检测HDV RNA484

二、聚合酶链反应检测HDV RNA486

第25章 戊型肝炎病毒及其抗体的检测489

第1节 概述489

第2节 ELISA检测抗-HEV IgM490

第3节 ELISA检测抗-HEV IgG493

第4节 免疫吸印法（WB）检测抗-HEV IgM和IgG497

第5节 PCR检测HEV RNA501

第26章 庚型肝炎病毒及其抗体的检验505

一、RT-PCR检测GBV RNA505

二、ELISA检测抗HGV抗体507

第27章 嗜肝DNA病毒和引起人类肝炎的其他病毒509

第1节 嗜肝DNA病毒分子生物学概论509

一、嗜肝DNA病毒的发现和分类509

二、嗜肝DNA病毒基因组结构和功能511

三、嗜肝DNA病毒复制周期512

四、嗜肝DNA病毒感染和发病机制515

第2节 土拨鼠肝炎病毒516

一、土拨鼠肝炎病毒的分子生物学特征516

二、土拨鼠肝炎病毒自名和实验感染517

三、土拨鼠肝炎病毒感染的发病机制518

四、土拨鼠肝炎病毒感染和原发性肝细胞肝癌519

第3节 鸭乙型肝炎病毒519

一、鸭乙型肝炎病毒的自然感染520

二、鸭乙型肝炎病毒实验感染521

三、DHBV感染鸭肝组织病理学523

第4节 引起人类肝炎的其他病毒524

一、引言524

二、疱疹病毒科与肝炎526

三、腺病毒科——腺病毒与肝炎527

六、副粘病毒科与肝炎528

五、披膜病毒科——风疹病毒与肝炎528

四、微小病毒科——人类微小病毒B19与肝炎528

七、输血传播病毒529

第28章 乙型肝炎疫苗的有效性、安全性监测530

一、乙型肝炎疫苗简介530

二、疫苗安全性监测530

三、疫苗有效性监测533

第29章 抗肝炎病毒药物的实验研究535

第1节 抗甲型肝炎病毒药物的实验研究537

一、体外细胞培养537

二、动物实验模型537

三、抗甲型肝炎病毒药物的实验研究538

一、抗乙型肝炎病毒药物的实验研究模型和方法541

第2节 抗乙型肝炎病毒药物的实验研究541

二、动物嗜肝DNA病毒的实验研究的模型和方法543

三、抗乙型肝炎病毒药物实验研究545

第3节 抗丙型肝炎病毒药物的实验研究551

一、抗HCV药物实验研究的体内外模型551

二、抗HCV药物实验研究553

第4节 肝炎病毒消毒约物的研究555

一、物理因子对肝炎病毒的灭活能力555

二、化学因子对肝炎病毒的灭活能力555

三、肝炎病毒消毒药物的实验方法556

第1节 HBV变异性及其检测方法559

第30章 肝炎病毒变异性及其检测方法559

第2节 HCV异质性及其检测方法564

第3篇病毒性肝炎的病理、免疫病理和分子病理学检查567

第31章 病毒性肝炎的病理诊断及检查567

第1节 病毒性肝炎的病理改变及各型肝炎的病理特征567

一、病毒性肝炎的病理变化567

二、各型肝炎的病理特点570

第2节 慢性肝炎的诊断、分级与分期570

第3节 病理切片及染色技术572

一、病理切片概述572

二、石蜡包埋切片方法573

三、HE染色576

四、网状纤维染色578

一、简史580

二、采取肝脏活组织方法580

三、适应证和禁忌证580

第4节 肝脏穿刺活组织检查580

四、肝穿刺活检581

五、并发症583

六、肝活检的临床意义584

第5节 检测PBMC中的HCV-RNA584

一、癌基因与抗癌基因586

二、肝细胞肝癌的癌基因与抗癌基因谱586

第6节 慢性肝炎和肝细胞肝癌癌基因检测586

三、癌基因检测587

第32章 病毒性肝炎免疫病理研究方法589

第1节 病毒性肝炎免疫病理研究进展589

一、机体抗病毒免疫应答与病毒感染的转归589

二、病毒致肝细胞破坏机制590

三、肝组织中病毒抗原检出状况590

第2节 免疫组织化学方法590

一、免疫荧光组织化学591

二、免疫酶组织化学方法592

三、免疫金-银染色法594

四、亲合免疫组织化学方法596

五、抗原抗体效价的测定597

六、对照设置598

七、微波在免疫组织化学中的应用599

第33章 病毒性肝炎的分子病理学601

第1节 病毒性肝炎的分子病理学进展601

一、乙型肝炎601

二、丙型肝炎602

第2节 分子病理学研究方法602

一、Southern Blot602

二、免疫转印技术606

三、原位杂交612

四、PCR和原位PCR614

五、细胞凋亡研究技术618

第4篇临床免疫学检验627

第34章 体液免疫功能的检测627

第1节 肝脏对血清Ig和补体的调节627

一、血清Ig含量的调节627

二、肝脏疾病与血清补体含量的关系628

三、检测方法及正常值629

第2节 血清IgG、IgA、IgM的检测630

一、单向免疫扩散试验630

二、免疫比浊试验630

第3节 IgD与IgE的检测631

一、免疫扩散放射自显影试验631

四、其它血清学方法631

三、免疫胶乳浊度测定法631

二、放射免疫分析技术632

三、酶联免疫吸附试验（ELISA）632

第4节 血清补体含量测定633

一、溶血法测定633

二、免疫血清学方法测定636

第35章 细胞免疫功能的测定638

第1节 T淋巴细胞亚群检验638

一、免疫荧光法638

二、免疫酶法——APAAP免疫酶桥法639

三、SPA花环法640

四、流式细胞仪（FCM）自动细胞计数法642

第2节 NK细胞活性测定643

一、51Cr释放法643

二、乳酸脱氢酶（LDH）释放法644

第3节 细胞毒试验645

一、特异性细胞毒性T细胞（CTL）活性测定——HBV特异性细胞毒性T细胞毒试验645

二、抗体依赖细胞介导的细胞毒（ADCC）试验——51Cr释放法648

三、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）活性测定649

第4节 白细胞移动抑制试验（LMIT）651

一、平皿打孔法651

二、毛细管法652

一、血细胞计数板法653

第5节 白细胞粘附抑制试验（LAT）653

二、电子血细胞计数器法655

第6节 迟发型皮肤变态反应655

一、植物血凝素试验（PHA皮试）656

二、二硝基氯苯试验（DNCB试验）657

第36章 细胞因子的检验659

第1节 概述659

一、细胞因子659

二、抗病毒活性的细胞因子659

三、检测技术660

第2节 人体干扰素的检验660

一、人体γ干扰素的测定660

二、干扰素α，β，γ诱导的抗病毒活性的检测（简述）662

第3节 肿瘤坏死因子的检验663

第4节 白细胞介素的检验665

一、白细胞介素2（IL-2）665

二、白细胞介素4（IL-4）667

三、白细胞介素6（IL-6）668

第5节 转化生长因子β的检验668

第37章 血清自身抗体的检测及其它测定672

第1节 非器官特异性自身抗体的检测672

一、血清抗核抗体的检测672

二、抗线粒体抗体（AMA）的测定673

三、抗平滑肌抗体（ASMA）的测定674

四、抗肝/肾细胞微粒体抗体Ⅰ型（A-LKM1）测定675

五、抗GOR抗体的测定676

六、固相放射免疫检测可溶性肝细胞抗原677

第2节 器官特异性的自身抗体的检测677

一、免疫荧光法测定抗肝细胞膜抗原（LMA）抗体677

二、抗甲状腺球蛋白抗体（抗-TG）的检测678

三、抗甲状腺微粒体抗体（抗-TM）的检测679

四、抗骨骼肌肌动蛋白抗体（抗-actin）的检测680

第3节 甲胎蛋白的测定680

一、ELISA法检测AFP680

二、标记抗原参入火箭电泳自显影法681

三、甲胎蛋白的放射免疫测定682

一、试管法685

第4 节 肝脏患者体液内毒素测定——鲎试验685

二、改良玻片染色法687

第5节 用于HLA分型的微量淋巴细胞毒试验688

第38章 免疫复合物的检验692

第1节 免疫复合物的免疫化学693

第2节 乙型肝炎循环免疫复合物的检测697

一、非特异性CIC检测697

二、单特异性CIC检测700

三、双特异性CIC检测702

第3节 丙型肝炎循环免疫复合物的检测705

一、胶固素结合法705

二、CIq结合免疫复合物试验707

一、肝脏的形态711

第1节 肝脏解剖结构711

第5篇病毒性肝炎的临床生物化学检验711

第39章 肝功能和肝脏生物化学711

二、肝脏的体表投影712

三、肝脏结构特点712

四、肝脏的显微结构712

五、肝外胆道系统713

第2节 肝细胞再生713

一、肝小叶713

二、肝细胞714

三、肝的再生714

五、养生因子715

四、肝细胞生长因子715

第3 节 肝细胞自身的调节716

一、肝细胞对自身再生的调节716

二、肝细胞对自身关键酶的调节716

第4 节 肝脏的分泌功能717

一、胆汁的分泌717

二、胆汁酸717

三、胆红素720

第5节 肝脏的物质代谢功能724

一、肝脏在糖代谢中的作用724

二、肝脏在蛋白质代谢中的作用725

三、肝脏在脂代谢中的作用726

四、肝脏在维生素代谢中的作用727

五、肝脏在激素代谢中的作用728

第6节 肝脏的生物转化728

一、生物转化概述728

二、生物转化的反应类型729

三、生物转化的特点732

四、影响生物转化的因素732

一、临床生化质量控制概念733

二、有关质控的统计学术语733

第1节 生化质量控制基本原理和方法733

第40章 血清生化指标测定733

三、生化质控的原理和方法734

四、其他用于生化结果统计的方法739

第2 节 蛋白质及蛋白质电泳检测743

一、血浆总蛋白及白蛋白测定743

二、血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳744

三、血清前白蛋白测定（免疫单扩散法）745

四、血氨测定（酶法）746

第3 节 脂类及脂蛋白质的检测747

一、血清总胆固醇测定（酶法）747

二、血清甘油三酯测定（酶法）747

三、脂蛋白电泳748

五、血清载脂蛋白B-100测定（免疫比浊法）749

四、血清载脂蛋白A-1测定（免疫比浊法）749

第4节 胆色素测定750

一、血清总胆红素和结合胆红素测定750

二、尿胆红素和尿胆原的测定753

第5节 糖耐量试验754

一、葡萄糖耐量试验754

二、半乳糖耐量试验756

第6节 凝血障碍测定758

一、凝血因子测定758

二、纤容系统的测定762

三、DIC实验室诊断概述765

一、亚铁嗪比色法测血清铁和总铁结合力767

第7节 血清铁和铜的测定767

二、铜试剂比色法测定血清铜769

第41章 血清酶测定的基本原理772

第1节 血清酶的来源、分类及临床意义772

一、血浆特异酶772

二、非血浆特异酶773

第2节 血清酶测定的条件及影响因素777

一、与酶活性测定有关的几个名词术语777

二、血清酶活性浓度测定的条件和影响因素780

第3节 血清酶活性浓度测定的基本方法782

一、连续监测法782

二、中止反应法784

第1节 肝细胞损伤有关的血清酶活性测定787

第42章 血清酶活性测定787

一、谷草转氨酶（GOT、AST、EC2、6、1、1）788

二、谷丙转氨酶（GPT、ALT、EC2、6、1、2）791

三、乳酸脱氢酶（LDH、EC1、1、1、27）792

四、腺苷脱氨酶（ADA、EC3、5、4、4）795

五、γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT、EC2、3、2、2）796

六、异柠檬酸脱氢酶（ICD、EC1、1、1、42）798

七、血清胆碱酯酶（SchE，EC3、1、1、8）799

八、谷胱甘肽-S转移酶（GST、EC2、5、1、18）801

九、醛缩酶（ALD EC4、1、2、13）802

十、山梨糖醇脱氢酶（SDH EC1、1、1、14）803

一、血清碱性磷酸酶（ALP、EC3、1、3、1）804

第2 节 肝胆系统梗阻有关的血清酶活性测定804

二、5 -核苷酸酶（5 -NT、EC3、1、3、5）806

第3节 肝纤维化有关的血清酶活性测定808

一、单胺氧化酶（MAO EC1、4、3、4）808

二、血清胆碱酯酶同工酶809

第43章 肝脏排泄功能试验812

第1节 四溴酚酞磺酸钠试验812

第2节 吲哚青绿814

第3节 胆汁酸817

经4节 药物代谢试验821

一、安替匹林血浆清除试验822

二、静脉色氨酸耐量试验823

第5节 碱性磷酸酶试验825

第6节 亮氨酸氨基肽酶试验828

第44章 临床生化组检试验（图）及应用832

第1节 概述832

第2节 临床生化组检试验（图）原理832

一、临床生化组检试验的选择832

二、临床生化组检图833

三、临床生化组检试验（图）结果分析原理833

第3节 肝脏疾病临床生化组检试验及组检图833

一、肝功能实验选择原则833

二、常见肝脏疾病实验结果异常机制836

三、病毒性肝炎及肝脏疾患生化组检试验（图）838

第45章 肝纤维化血清标志物检验841

第1节 星状细胞的分离、培养和鉴定方法841

第2节 其它肝脏细胞的分离方法843

第3节 血清肝脏细胞外基质成分的检验843

一、Ⅲ型前胶原氨基端肽843

二、层连蛋白845

三、Ⅳ型胶原847

四、金属蛋白酶组织抑制因子849

五、透明质酸851

六、脯氨酸羟化酶（Prolyl Hydroxylase，PH）853

一、血清转氨酶857

第1节 急性肝炎857

第46章 各型病毒性肝炎生化指标特点857

二、胆红素858

三、血清ALT、胆红素和各型肝炎病原学的关系859

第2节 慢性肝炎860

第3节 重型肝炎862

一、凝血酶原活动度（PTA）862

二、血清胆红素862

三、血清转氨酶863

四、AST/ALT比值863

五、血清胆碱酯酶863

九、血氨864

十、血浆支链氨基酸/芳香氨基酸比值（BCAA/AAA）864

六、血浆胆固醇864

八、血清补体CH50和C3864

七、血清蛋白电泳864

十一、谷胱甘肽-s-转移酶865

第4节 淤胆型肝炎865

一、急性淤胆性肝炎865

二、慢性淤胆性肝炎866

第5节 肝炎肝硬化866

一、常规肝功能指标的改变866

二、肝纤维化血清指标867

附录2 各种凝胶所允许的最大操作压870

附录1 琼脂糖凝胶的技术数据870

附录3 常用缓冲液的pKa值871

附录4 各种pH值的Tris缓冲液的配制872

附录5 温度对50mmol/L Tris·CI液pH值的影响872

附录6 分子克隆常用缓冲液873

附录7 磷酸缓冲液874

附录8 电泳缓冲液875

附录9 琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围877

附录10 常用贮存液的配制877

附录11 杂交试验中用于降低背景的封闭剂881

附录12 常用酶的配制881

附录15 玻璃和塑料器皿的硅化884

附录13 葡聚糖（Sephadex）的处理884

附录14 DNA与RNA的定量884

附录16 透析袋的处理885

附录17 常用抗生素的工作浓度885

附录18 十进位数量词头及符号886

附录19 物质的量和物质的浓度886

附录20 常用单位的换算886

附录21 引物用量的计算887

附录22 国内有关肝炎病毒的单克隆抗体一览表888

附录23 HCV基因型和亚型一览表891

本书有关的略语894

汉英文对照索引901