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第一编血栓与止血1

第1章 止血与凝血检验的基础——止血与凝血生理1

第1节 血管壁的止血功能1

一、血管壁的结构与调控1

二、血管壁的止血功能2

第2节 血小板的止血功能3

一、超微结构及生化组成3

二、血小板的止血功能8

第3节 血液凝固机理10

一、凝血因子10

二、凝血机理14

第4节 抗凝血系统15

一、细胞的抗凝血机理15

二、体液的抗凝血机理15

第5节 纤溶系统17

一、纤溶系统的组成和各种成分的特点17

二、纤溶系统的激活途径及其作用机理18

第6节 止血与凝血疾病的病因分类20

第7节 出血性疾病实验室检查21

一、常规检查22

二、检查凝血因子的初筛试验22

三、血小板功能检查22

五、疑有原发性纤溶或DIC所引起的继发性纤溶23

四、血循环中的抗凝物质23

第2章 血栓与止血检验25

第1节 试剂与准备25

一、抗凝剂25

二、清洁液(洗涤液)的配制法26

三、玻璃器皿的硅化、脱硅处理及其它26

四、血标本的收集27

五、正常对照问题27

六、试剂27

第2节 毛细血管功能检测28

一、出血时间(BT)测定28

三、甲襞毛细血管镜检查30

二、阿斯匹林耐量测验(ATT)30

四、vWF:Ag测定(火箭电泳法)31

五、vWF:Ag双向交叉免疫电泳—检测血管性假血友病因子32

六、vWF瑞氏托霉素辅因子测定(vWF:Rcof)33

七、6-酮-前列腺素Fla测定(6-酮-PGFla)—抗原测定放射免疫法33

八、凝血酶调节蛋白测定(TM)—抗原测定(TM:Ag放射免疫法)35

第3节 血小板数量及功能的检测35

一、血小板形态检测35

二、血小板平均体积测定(MPV)37

三、血小板生存时间的检测(PLS)—丙二醛法(MDA)法38

四、血小板粘附试验(PAdT)或血小板滞留试验39

五、血小板聚集试验(PAgT)40

七、血小板ATP释放试验43

六、血小板自发性聚集试验43

八、5-羟色胺测定(5-HT,荧光光度法)44

九、血浆β-血小板球蛋白(β-TG)和血小板第4因子(PF4)测定(放射免疫法)45

十、血小板凝血酶致敏蛋白测定(TSP放射免疫法)46

十一、血浆血小板第4因子(PF4)测定(凝血酶法)47

十二、血浆纤维连结蛋白测定—Laurell免疫火箭电泳法48

十三、蝰蛇毒血小板第3因子有效性测定(RVV-PF3dT)48

十四、血小板第3因子有效性测定(PF3dT)49

十五、血块收缩试验(CRT)50

十六;血小板PF-6测定51

十七、血栓烷B2测定(TXB2)放射免疫法51

十八、前列腺素D2测定(PGD2放射免疫法)52

二十、前列腺素F2a测定(PGF2a)(放射免疫法)53

十九、前列腺素E2测定(PGE2)(放射免疫法)53

二十一、血小板内cAMP和cGMP测定(放射免疫法)54

二十二、血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa自身抗体测定(ELlSA)法55

二十三、改良HSM法测定血小板抗体56

二十四、血小板表面相关IgG、IgM、IgA、C3测定(双抗体夹心酶联免疫试验)58

第4节 凝血因子检测60

一、血浆激肽释放酶原激活物活性测定(PKA发色底物法)60

二、血浆激肽释放原活性(PK:C测定发色底物法)61

三、血浆激肽释放酶原抗原(PK:Ag测定免疫火箭电泳法)62

四、组织激肽释放酶测定(TK)(ELlSA法)63

五、血凝固时间(CT)(Lee—While试管法)65

七、硅管凝血时间测定(SCT)66

六、复钙时间测定(RT)又称血浆凝固时间测定66

九、白陶土部分凝血活酶时间测定(APTT)67

八、活化凝血时间测定(ACT)67

十、简易凝血活酶生成试验(STGT)68

十一、凝血活酶生成试验(TGT)BiggS法70

十二、凝血因子Ⅷ:C测定(一期法)72

十三、凝血酶原时间测定(PT—期法)74

十四、凝血酶原时间延长的纠正试验75

十五、蝰蛇毒磷酯时间(RVVCT)76

十六、肝脏储备功能检查77

十七、凝血因子Ⅱ(Ⅱ:C)、V(V:C)、Ⅶ(Ⅶ:C)、X(X:C)测定77

十八、凝血因子V活动度测定78

二十、异常凝血酶原测定79

十九、凝血因子Ⅶ活动度测定79

二十一、凝血因子XⅢ筛选试验80

二十二、单碘醋酸耐量试验81

二十三、纤维蛋白原定量试验(比浊法)81

第5节 抗凝物质测定82

一、抗凝血酶Ⅲ抗原测定(ATⅢ:Ag)Laurell免疫火箭电泳法82

二、抗凝血酶Ⅲ的肝素辅因子活性测定(ATm:C)83

三、蛋白C抗原测定(PC:Ag)(Laurell免疫火箭电泳法)85

四、蛋白S抗原测定(PS:Ag)(Laurell免疫火箭电泳法)86

五、α2-巨球蛋白抗原测定(α2-M:Ag)(Laurell免疫火箭电泳法)86

八、病理性抗凝物质复钙交叉试验87

六、α1-抗胰蛋白酶抗原测定(α1-AT:Ag)(Laurell免疫火箭电泳法)87

七、C1抑制剂抗原测定(C1-INH:Ag)(Laurell免疫火箭电泳法)87

九、抗血浆凝血活酶的抗凝物质测定88

十、凝血因子Ⅷ抑制测定89

十一、血浆游离肝素时间测定(甲苯胺蓝纠正试验)90

第6节 纤溶活性检测90

一、可溶性纤维蛋白单体复合物(SFMC)测定90

二、血浆鱼精蛋白副凝固试验(3P试验)91

三、血清纤维蛋白(原)降解产物(FDP)测定(鞣比红细胞血凝抑制试验)92

四、凝血酶时间测定(TT)94

五、优球蛋白溶解时间测定(ELT)95

六、组织纤溶酶原激活物活性测定(t-PA:C)(发色底物法)96

七、血浆素原测定97

八、纤溶酶活性测定(PL:C)(刚果红染色法)98

九、纤溶酶原激活抑制物活性测定(PAI:C)(发色底物法)100

十、α2-纤溶酶抑制物活性测定(α2-PI:C)(发色底物法)101

十一、D-二聚体测定(乳胶凝集法)102

十二、纤维蛋白肽A(FPA)测定102

第7节 血栓与出血疾病检查结果分析104

一、过筛检查有否出血疾病的存在104

二、进一步确定出血疾病类属105

三、确诊病因和病种的实验检查105

第8节 血栓与止血检测方法的质量控制110

一、标本的质量控制110

四、试剂的质量控制在试验中试剂的质量、浓度、种类都对结果有直接影响111

二、对照问题111

三、被测标本的自然变化111

五、仪器及器皿质量控制112

六、对结果分析应注意的问题112

第3章 血栓与止血疾病诊断标准113

第1节 血管性紫癜113

第2节 过敏性紫癜113

第3节 遗传性出血性毛细血管扩张症115

第4节 血小板减少116

第5节 血栓性血小板减少性紫癜117

第6节 原发性血小板增多症119

第7节 巨血小板综合征119

第8节 血小板无力症120

第9节 血小板分泌功能缺陷性疾病121

第10节 原发性血小板第3因子(PF-3)缺陷121

第11节 友病A(甲)(AHG缺乏)122

第12节 血友病B(乙)(PTC缺乏)123

第13节 因子Ⅺ缺乏症又称血友病C(丙)(PTA缺乏症)123

第14节 血管性血友病(VWD)124

第15节 弥散性血管内凝血(DIC)126

第16节 纤维蛋白溶解综合症128

二、无效的红细胞破坏130

一、衰老红细胞的血红蛋白释放130

第2节 正常胆红质代谢130

第1节 概念130

第二篇溶血性疾病确诊检查130

第1章 溶血的概述130

二、胆红质代谢途径131

四、胆红质在肝外代谢131

三、胆红质在肝内代谢131

五、胆红质产生影响因素131

一、红细胞的破坏131

第3节 胆红质生成机制131

三、肝脏和其它组织内含血红素的血红蛋白131

第4节 溶血部位及特征132

一、血管外溶血132

二、血管内溶血132

第5节 溶血化验特征133

一、溶血的破坏加速指标133

二、代偿增生的指标133

三、异常代偿能力134

四、红细胞损害性变化的证据134

四、突出体征135

三、脾肿大135

五、病史135

二、黄疸135

一、贫血貌135

第6节 溶血性贫血的突出体征135

六、家族遗传史136

七、继发其它病如肿瘤、红斑狼疮、心瓣膜手术、烧伤等136

八、维生素代谢障碍136

九、输血及同种免疫136

十、地区史136

第2章 溶血实验确诊检验技术137

第1节 确定有否溶血过筛检验诊断(包括溶血部位)137

一、游离Hb测定(P-Hb)137

二、结合珠蛋白测定—电泳法(HP-Hb)138

三、血清结合珠蛋白电泳显色定量法139

四、尿含铁血黄素(Rous)试验140

五、高铁白蛋白测定(MHA)141

六、其它141

第2节 红细胞膜缺陷溶血病因检验141

一、红细胞渗透性及37C孵育24小时脆性试验141

一、红细胞过氧比氢溶血试验(PHT)145

三、酸化甘油溶解试验(AGLT)146

四、新生儿椭圆形红细胞增多症的红细胞碎裂试验147

五、蔗糖高渗冷溶血试验147

六、蛇毒因子溶血试验(COF)148

七、阵发性血红蛋白尿二项鉴别试验149

八、微量补体溶血敏感试验(CLS)149

十、酸溶血试验(Ham s)154

九、糖溶血试验154

一、抗人球蛋白(Coomb’s)试验155

第3节 红细胞免疫抗体测定155

二、改良抗人球蛋白直接试验157

三、红细胞表面抗体的免疫球蛋白分型试剂盒158

四、冷凝集素试验159

五、冷热双溶试验(当-兰氏试验)160

六、自身血皮内试验(Retnoff)161

第4节 新生儿溶血检验诊断162

一、准备162

二、操作方法166

三、阴性、阳性及自身对照166

五、产妇血清ABO系统以外的抗体检查168

四、血型鉴定168

六、Rh系统抗体效价测定169

七、ABO溶血病血型血清学检查169

八、产妇血清中IgG抗A(B)效价测定170

九、新生儿溶血病血清学检验程序172

第5节 红细胞酶缺陷检验诊断172

一、高铁血红蛋白还原试验(微量法)172

二、红细胞休克试验(一管法)173

三、红细胞自溶试验173

四、丙酮酸激酶测定(PK)175

五、丙酮酸激酶的荧光“点”试验(PK)176

六、红细胞嘧啶5′核苷酸酶测定(P5′N)177

七、红细胞葡萄糖磷酸异构酶测定(GPI)178

八、红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6-PD)及葡萄糖酸6-磷酸脱氢酶(6PGD)178

九、改良红细胞还原型谷胱甘肽二硫双硝基苯甲酸定量测定(DTNB)180

十、全血胆碱酯酶测定(AchE)182

十一、红细胞磷酸甘油酸激酶测定(PGK)183

十二、红细胞腺苷酸激酶测定(AK)测定184

十三、红细胞己糖激酶测定(HK)186

十四、红细胞磷酸果糖激酶测定(PFK)187

十五、红细胞腺苷脱氨酶测定(ADA)189

十六、红细胞醛缩酶测定(ALD)190

十七、红细胞烯醇化酶测定(EnoL)191

十八、红细胞磷酸甘油醛脱氢酶测定(GAPD)192

二、热不稳定试验193

十九、红细胞核苷磷酸化酶测定(NP)194

二十、血胞磷酸己糖异构酶195

第6节 异常血红蛋白及不稳定血红蛋白检测196

一、异丙醇过筛试验196

三、抗碱血红蛋白测定(HbF)197

四、Heinz小体生成试验(又称变性珠蛋白小体生成试验)198

五、血红蛋白“H”包涵体检测198

六、血红蛋白C试验199

七、异常血红蛋白微量电泳筛选试验199

八、糖血红蛋白测定(GHb)(电泳法)201

十二、粘蛋白(淀粉状蛋白)检测203

十一、巨球蛋白测定203

九、冷球蛋白测定203

十、热球蛋白鉴别试验203

十三、直立蛋白尿检查(尿磺酸盐试验)204

十四、高铁血红蛋白与硫化血红蛋白的测定204

第7节 溶血各项检验指标结果分析205

一、实验室检查要点205

二、溶血部位确定206

三、确定溶血病因检验206

第3章 溶血性疾病诊断标准216

第1节 珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血、海洋性贫血)216

第2节 异常血红蛋白病218

第3节 遗传性球形红细胞增多症(HS)219

第4节 遗传性椭圆形红细胞增多症(HE)220

第5节 遗传性口形红细胞增多症221

第6节 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)222

第7节 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症224

第8节 丙酮酸激酶缺乏症(PKD)226

第9节 阵发性寒冷性血红蛋白尿症(PCH)227

第10节 微血管病性溶血性贫血(MAA)227

第11节 高铁血红蛋白血症(MHb血症)228

第12节 硫化血红蛋白血症(SHb血症)229

第13节 放射线病诊断标准229

第15节 温抗体型自身免疫性溶血性贫血230

第14节 单纯红细胞再生障碍性贫血230

第16节 冷凝集素综合征(CAS)231

第三篇细胞化学染色及免疫细胞化学233

第1章 细胞化学染色233

第1节 全显染色法(瑞-姬氏双重染色Wright’S-Giemsa S stain)233

第2节 琥珀酸脱氢酶染色(Cytochemical stain)235

第3节 3′(2′)-核苷酸酶染色(Wachstein法)235

第4节 简易过氧化酶染色(POX)236

第5节 碱性磷酸酶染色(ALP)(KaplonS偶氮偶联法)238

第6节 碱性磷酸酶ALP快速测定(钙—钴法)241

第7节 酸性磷酸酶染色法(ACP)241

三、对品红酸性磷酸酶染色法242

一、固酱紫GBC(Fast garntGBC)酸性磷酸酶染色法242

二、固红ITR酸性磷酸酶染色法242

第8节 过碘酸-雪夫氏染色法(PAS)243

第9节 抗酒石酸性磷酸酶染色法246

第10节 酯酶染色法247

一、特异性酯酶染色法(氯乙酸萘酚AS-D)248

二、特异性酯酶氯醋酸萘酯酶染色法(CE)249

三、非特异性酯酶染色法(α-醋酸萘酯酶NAE)250

四、α-丁酸萘酯酶染色法(NBE)251

五、酸性非特异性酯酶染色法(ANAE)252

第11节 铁染色(Fe)252

第12节 苏丹黑B染色(SB)254

第13节 甲绿哌啷宁染色法显示核糖核酸(RNA)256

第14节 Feulgen氏反应显示脱氧核糖核酸(DNA)258

第15节 三磷酸腺苷酶(ATP酶)染色(钙法)259

第16节 末端脱氧核苷酸转移酶(Tdt)测定260

第17节 核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)染色262

第18节 溶菌酶活力测定(比浊法)265

第19节 硝基四氮唑蓝染色(NBT)266

第20节 嗜酸性粒细胞改良过氧化酶染色法267

第22节 吞墨试验268

第23节 点彩红细胞染色法268

第21节 甲苯胺兰嗜碱性粒细胞染色法268

第24节 网织红细胞活体染色(RC)269

第25节 红细胞碱粒凝集试验271

第26节 热盐水溶解试验271

第2章 免疫细胞化学273

第1节 抗原和抗体的基本概念273

第2节 荧光色素274

第3节 免疫荧光技术275

第4节 免疫酶标技术276

第5节 免疫酶标记染色方法278

第6节 免疫酶标记的影响因素及注意事项280

第7节 各系造血细胞分化抗原与白血病表型的相互关系281

第8节 细胞化学和免疫酶标技术在病态巨核细胞研究中应用282

第9节 T淋巴细胞亚群检测新方法—APAAP桥联酶标技术286

第10节 单克隆抗体测定(免疫荧光法)290

第3章 血细胞化学染色分析292

第1节 网织红细胞(Reticulocyte简称RC)292

第2节 过氧化物酶(POX)293

第3节 中性粒细胞碱性磷酸酯酶(ALP)294

第4节 糖原染色(PAS)295

第5节 酯酶(Esterasc)296

第6节 酸性磷酸酯酶(ACP)297

第7节 苏丹黑B染色(SB)297

第8节 溶菌酶(Lgsoegme)297

第9节 骨髓铁染色(Fe)298

第四篇血液病特殊检验302

第1章 卟啉代谢检测302

第1节 红细胞内游离原卟啉(FEP)测定302

第2节 血液卟啉测定304

第3节 尿中卟啉(尿紫质)的测定304

第4节 尿中卟啉胆原的测定(亦称紫胆原、简称PBG)305

第2章 肿瘤代谢产物检测306

第1节 血清耐热试验306

第2节 血清紫色反应(简称P·D·AB试验)306

第3节 尿癌反应(UCT)307

第4节 凝溶蛋白检查法309

第1节 外周血异常细胞检测310

第3章 特殊异常细胞检测310

第2节 血液浓集涂片、查找异常细胞311

第3节 流感细胞检查(下鼻甲压片细胞检查)311

第4节 麻疹细胞检查(咽部痰液等检查Warthin-Finkeldey氏细胞)311

第5节 承?病淋巴细胞及嗜中性粒细胞浆内粘多糖包涵物检查312

第6节 巨细胞性包涵体检查313

第7节 红斑狼疮细胞检查(LE cell)314

第4章 血细胞释放功能检测316

第1节 肾上腺激发试验(唐氏试验)316

第2节 骨髓粒细胞有效储备的测定316

一、染色体的数目与形态特征318

第1节 染色体的基本知识318

第5章 人类染色体及检测318

二、染色体畸变319

三、染色体异常与白血病321

第2节 G显带染色体技术及各号染色体鉴别323

一、细胞培养和染色体标本制作323

二、染色体的带型特点324

第3节 人类染色体核型分析328

一、镜检328

二、核型分析329

三、结果分析及报告329

第4节 姐妹染色单体互换技术330

第1节 白细胞凝集试验332

第6章 白细胞免疫抗体检测332

第2节 白细胞溶解反应和细胞毒性活力试验333

第3节 间接嗜碱细胞脱颗粒试验(BDT)333

第4节 皮肤反应334

第7章 其它有关检验335

第1节 血清四铁测定335

第2节 嗜异性凝集试验(Paul-BunneU试验)337

第3节 嗜异性凝集鉴别试验338

第4节 2%曙红快速染色法光镜检测尿中红细胞、管型分型339

第3章 血液常规检验质量控制341

第1节 室间质量控制341

第2节 室内质量控制341

第3节 血红蛋白测定(氰化高铁Hb法)344

第4节 血红蛋白吸管校正方法345

第5节 关于容量仪器的鉴定与校正346

第9章 胎肝制备及输注常规349

第10章 造血细胞体外琼脂培养351

第1节 粒系祖细胞体外培养351

第2节 红系祖细胞体外血浆凝块培养352

第3节 集落刺激因子(CSF)的制备方法354

附录356

一、血液病英文缩写356

二、血液病学各种检验正常参数358

三、血液病附表376

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