《现代生化技术》求取 ⇩

第一篇生化分离技术1

第一章 生物大分子的是取与沉淀分离技术1

第一节 细胞破碎1

第二节 蛋白质和酶的提取与沉淀分离3

第三节 核酸的提取与沉淀分离10

第四节 实验12

实验 1—1 大肠杆菌细胞的超声波破碎12

实验 1—2 枯草杆菌碱性磷酸酶的提取与盐析12

实验 1—3 枯草杆菌 DNA 的提取与分离14

实验 1—4 酵母 RNA 的提取与分离15

实验 1—5 大蒜细胞 SOD 提取与分离16

实验 1—6 大鼠肝 rRNA 的提取与会分离18

第二章 层析分离技术19

第一节 吸附层析19

第二节 分配层析23

第三节 离子交换层析38

第四节 凝胶层析42

第五节 亲和层析46

第六节 实验47

实验 2—1 蛋白质溶液的凝胶层析脱盐47

实验 2—2 氨基酸的纸层析48

实验 2—3 核苷酸的离子交换层析50

实验 2—4 胰蛋白酶的亲和层析52

实验 2—5 凝脱层析测定蛋白质的相对分子质量53

实验 2—6 DNS—氨基酸的聚酰胺薄膜层析55

实验 2—7 醇酯成分的气相层析57

实验 2—8 胆酸混合液的薄层层析59

第三章 电泳技术60

第一节 电泳的基本原理60

第二节 纸电泳61

第三节 薄层电泳63

第四节 薄胶电泳64

第五节 凝胶电泳64

第六节 等电点聚焦电泳68

实验 3—1 核苷酸的纸电泳71

第七节 实验71

实验 3—2 蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳72

实验 3—3 DNA 的琼脂糖凝胶电泳73

实验 3—4 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳75

实验 3—5 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量77

实验 3—6 蛋白质的二元凝胶电泳78

第四章 离心分离技术81

第一节 离心机的种类与用途81

第二节 离心方法的选择82

第三节 离心条件的确定84

第四节 实验86

实验 4—1 细菌核糖体的分离86

实验 4—2 大肠杆菌细胞膜的分离87

实验 4—3 RNA 的蔗糖密度梯度离心分离88

实验 4—4 大鼠肝细胞核的分离89

第五章 化学检测技术91

第一节 糖类的化学检测91

第二篇生化检测技术91

第二节 蛋白质和氨基酸的化学检测95

第三节 蛋白质的免疫化学检测104

第四节 核酸的化学检测106

第五节 实验108

实验 5—1 斐林试剂置换法测定还原糖108

实验 5—2 葡萄糖淀粉酶的活力测定109

实验 5—3 微量凯氏定氨法测定总氮量111

实验 5—4 福林-酚试剂法测定蛋白质含量112

实验 5—5 丹磺酰化法分析蛋白质N-末端氨基酸113

实验 5—6 异硫氰酸苯酯分析法测定肽链的氨基酸排列次序114

实验 5—7 茚三酮显色法测定氨基酸含量116

实验 5—8 双向免疫扩散法测定抗血清效价117

实验 5—9 定磷法测定核酸含量118

实验 5—10 地衣酚显色法测定 RNA 含量119

实验 5—11 二苯胺显色法测定 DNA 含量120

第六章 光学检测技术122

第一节 旋光检测技术122

第二节 荧光检测技术123

第三节 分光光度检测技术126

第四节 实验127

实验 6—1 旋光法测定味精的纯度127

实验 6—2 荧光法测定核黄素含量128

实验 6—3 荧光法测定氨基酸含量129

实验 6—4 紫外吸纠法测定核酸含量130

实验 6—5 紫外吸收法测定蛋白质含量131

第七章 气体检测技术132

第一节 华勃氏呼吸仪检压法133

第二节 范· 斯莱克检测仪测定a-氨基酸含量135

第三节 实验136

实验 7—1 酵母细胞耗氧量的测定136

实验 7—2 华勃氏呼吸仪测定L-谷氨酸脱羧酶活力137

实验 7—3 华勃氏呼吸仪测定L-谷氨酸含量138

第八章 放射性同位素检测技术140

第一节 基本知识140

第二节 放射性同位素的检测142

第三节 放射性同位素的掺入145

实验 8—1 p-32P-ATP 的酶促合成146

实验 8—2 3H-蛋白质的生物合成146

第四节 实验146

实验 8—9 3H-蛋白质凝胶的放射荧光显影147

第九章 生物检测技术149

第一节 生物检测的主要内容149

第二节 抗生素的生物检测151

第三节 生长促进物质的生物检测152

实验 9—1 卡那霉素的效价测定153

第四节 实验153

实验 9—10 二环素的杀菌能务测定154

第十章 核磁共振检测技术156

第一节 核磁共振的基本原理156

第二节 核磁共振的操作要点160

第三篇酶、基因和细胞操作技术163

第十一章 酶技术163

第一节 酶生物合成的调节163

第二节 酶反应动力学的研究167

第三节 酶、细胞和原生质体固定化技术171

第四节 酶分子修饰175

第五节 实验183

实验 11—1 β-半乳糖苷酶的诱导合成183

实验 11—2 无机磷酸对枯草杆菌碱性磷酸酶生物合成的阻遏作用184

实验 11—3 碱性磷酸酶的反应动力学性质185

实验 11—4 L- 谷氨酸脱羧酶的固定化187

实验 11—5 枯草杆菌细胞固定化188

实验 11—6 谷氨酸棒杆菌原生质体固定化188

实验 11—7 固定化原生质生产谷氨酸脱氢酶189

第十二章 克隆技术191

第一节 基因的获取技术191

第二节 载体的制备技术193

第三节 限制性内切核酸酶的应用195

第四节 基因重组197

第五节 细胞转化和基因表达197

实验 12—1 大肠杆菌 Col EI 质粒的分离199

第六节 实验199

实验 12—2 重组 DNA 的细胞转化201

第十三章 细胞和原生质体融合技术202

第一节 细胞融合202

第二节 原生质体分离204

第三节 原生质体融合205

第四节 细胞壁的再生206

实验 13—2 酵母原生质体的分离与再生207

实验 13—1 枯草杆菌原生质体的制备207

第五节 实验207

实验 13—3 从胡萝卜细胞分离原生质体208

附录210

一、常用缓冲液的配制210

二、指示剂的配制217

三、气体检测常用的物理常数219

四、氨基酸的一些理化常数220

五、某些有机溶剂的一些物理常数221

主要参考书目222