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第一节 组织培养原理1

第一章 概论1

第二节 研究概况3

第三节 实验室的建立10

一、实验室设计10

二、基本设备12

三、所用仪器13

四、常备药品14

五、材料器皿洗涤消毒17

六、实验室要求与无菌操作30

第四节 基本技术31

一、培养基31

二、材料选择与表面消毒44

一、主要用途55

第二章 组织培养55

第一节 茎尖培养55

二、培养方法56

三、苹果茎尖培养58

四、梨茎尖培养63

五、葡萄茎尖培养66

六、桃茎尖培养70

七、樱桃茎尖培养74

八、山楂茎尖培养77

九、黑穗醋栗茎尖培养78

十、草莓茎尖培养78

十一、枇杷茎尖培养80

十二、番木瓜茎尖培养81

十三、香蕉茎尖培养83

十四、柑桔茎尖培养84

十五、核桃茎尖培养85

十六、板栗茎尖培养87

十七、柿茎尖培养88

十八、梨、榅桲茎尖培养88

十九、李茎尖培养88

第二节花药培养89

一、培养方法90

二、培养基91

三、苹果花药培养96

四、梨花药培养97

五、葡萄花药培养98

六、草莓花药培养100

七、柑桔花药培养101

八、荔枝花药培养102

九、龙眼花药培养103

十、西瓜花药培养104

第三节 胚培养105

一、胚培养105

二、苹果种胚辐射离体培养109

三、苹果胚培养111

四、葡萄胚培养111

五、桃胚培养112

六、酸枣胚培养115

七、山楂胚培养115

八、樱桃胚培养117

九、草莓胚培养117

十、梨胚培养117

十二、核桃胚培养119

十一、猕猴桃胚培养119

十三、柑桔胚培养120

十四、四季桔种胚培养121

十五、哈密瓜幼胚培养121

十六、西瓜种胚培养122

十七、甜瓜胚培养124

第四节 胚乳培养125

一、胚乳培养中愈伤组织形成与器官化的条件126

二、胚乳培养中的组织学和细胞学研究128

三、胚乳培养物的形态建成129

四、胚乳培养物的染色体131

五、苹果胚乳培养132

六、葡萄胚乳培养134

八、猕猴桃胚乳培养135

七、桃胚乳培养135

九、枣胚乳培养137

十、柑桔胚乳培养138

十一、枇杷胚乳培养139

十二、梨胚乳培养139

第五节 器官培养140

一、苹果的短枝扦插140

二、猕猴桃器官培养141

三、石榴叶片培养146

四、核桃愈伤组织诱导148

五、金柑组织培养149

六、枳胚珠培养150

八、菠萝组织培养152

九、黄菠萝组织培养152

十、香蕉组织培养153

十一、柚子组织培养155

十二、葡萄组织培养155

十三、无籽西瓜组织培养156

十四、白兰瓜组织培养156

七、柑桔茎段培养157

十五、菠萝果实培养157

十六、西瓜子叶和下胚轴培养157

十七、苹果叶片培养158

十八、苹果叶柄培养159

十九、核桃器官培养159

二十、枣茎段培养160

二十一、榛子组织培养161

二十二、凤梨组织培养162

三十三、扁桃组织培养163

二十四、李胚与子叶培养164

第三章 愈伤组织与细胞培养165

第一节愈伤组织培养165

一、培养技术165

二、愈伤组织的诱导167

三、愈伤组织的生长168

四、愈伤组织的分化169

第二节 细胞悬浮培养170

一、概述170

二、操作程序170

第三节 胚状体173

一、胚状体的概念与研究胚状体的意义173

二、胚状体发生的普遍性174

四、诱导胚状体的因素175

三、胚状体的胚胎发生过程175

五、胚状体与器官发生型的识别176

第四章 果树无病毒苗的培育177

第一节 病毒危害177

第二节 脱毒方法177

第三节 脱毒苗的鉴定179

第四节 无病毒苗的保存与利用180

第五节 苹果无病毒苗的培育181

第六节 柑桔无病毒苗的培育182

第七节 草莓无病毒苗的培育187

第八节 葡萄无病毒苗的培育192

第五章 生长发育与激素控制194

第一节 激素与胚胎培养195

第二节激素与花药培养202

第三节 激素与器官培养208

第四节 激素与原生质体培养213

第六章 种质资源的低温保存217

第一节 低温保存217

第二节冷冻保存218

第三节 超低温冰冻保存的操作程序222

第四节 苹果培养茎尖的超低温保存223

第五节 苹果冬芽的超低温保存223

第六节 草莓茎尖分生组织的冷冻保存224

第七节 冷冻保存技术的应用及其问题225

第七章 体细胞突变与筛选227

第一节 从植物培养细胞分离突变体227

第二节 突变体的选择230

第三节从培养离体器官分离突变体231

第四节 分子生物学诱变234

一、培养细胞的染色体变异237

第五节 植物培养细胞的染色体变异与鉴定方法237

二、染色体的鉴定方法238

第六节 果树染色体观察方法241

第七节 同工酶的应用与测定技术246

一、应用246

二、测定技术247

第八章 试管受精250

第一节 操作方法250

第二节 影响试管受精成功的因素252

第三节 试管受精技术在杂交育种上的应用254

第一节 果树原生质体培养现状与展望256

一、概况256

第九章 原生质体培养256

二、原生质体分离258

三、原生质体培养264

四、展望268

第二节 原生质体分离与培养270

一、原生质体分离纯化270

二、原生质体无关培养281

三、原生质体培养中的生长与分化285

第三节 苹果原生质体培养287

第四节 梨原生质体培养293

第五节 葡萄原生质体培养296

第六节 猕猴桃原生质体培养297

第七节 樱桃原生质体培养302

第八节 柑桔原生质体培养307

第九节 龙眼原生质体培养309

第十节 甜瓜子叶原生质体培养311

第十一节 哈密瓜原生质体培养315

第十章 原生质体融合318

第一节自发融合与诱导融合319

第二节 诱导剂与诱导融合319

一、PEC诱导融合法319

二、融合体培养和核融合322

三、融合体的选择323

第三节 柑桔种间原生体融合326

一、原生质体分离326

二、原生质体融合327

三、融合体的培养327

第十一章 基因工程331

一、启动子332

第一节 基因的构成和组建332

二、结构基因336

三、调整子337

四、终止子338

第二节 选择标志基因介绍339

第三节 基因转移方法340

一、农杆菌基因转化法340

二、生物射击法351

三、聚乙二醇转化法353

四、电场诱导转化法354

五、湿微注射法355

六、其它基因转化法355

七、基因转化法小结356

第四节 基因的表达分析与鉴定357

一、GUS测定358

二、DNA与DNA杂交法359

三、DNA与RNA杂交法360

四、蛋白质杂交技术362

五、聚合酶链反应363

第五节 抗性及其它有关基因的研究与应用364

一、抗病毒基因的转化364

二、抗虫基因的转化366

三、抗细菌性病害的基因转化368

四、抗真菌性病害的基因转化371

五、其它基因研究373

第六节 几种果树瓜类的基因转移380

一、苹果的基因转移380

二、桃的基因转移382

三、核桃的基因转移383

四、葡萄的基因转移385

五、草莓的基因转移386

六、李的基因转移388

七、香瓜的基因转移388

第十二章 PCR技术原理与应用390

第一节 原理390

第二节 特点391

第三节 影响PCR的因素393

第四节 问题及解决办法395

第五节 Tag DNA 聚合酶的性能396

第六节 PCR方法397

第七节 PCR的应用400

附录403

一、术语解释403

二、果树组织培养名录407

参考文献471

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