《用现代生物技术异地冷冻保存濒危牛的基因》求取 ⇩

1引言1

1.1 品种的概念和品种濒危的标准1

1.1.1 品种的概念1

1.1.2 品种濒危的标准1

1.2 保护濒危品种的理由2

1.3 确定基因储备的基本方法4

2基因组6

2.1 保存6

2.1.1 胚胎(超数排卵、受精卵的采集及冷冻保存)6

2.1.2 胚胎的操作13

2.1.3 细胞和核16

2.1.4 精液17

2.1.4.1 精液的冷冻保存17

2.1.4.2 深度冷冻精液的长期贮存19

2.1.5 卵母细胞20

2.1.5.1 排出的卵母细胞的收集20

2.1.5.2 从卵巢收集卵母细胞20

2.1.5.3 体外受精20

2.1.5.4 深度冷冻和解冻后卵母细胞的体外受精20

2.2 复原21

2.2.1 解冻胚胎的移植21

2.2.2 用卵裂球和保存的细胞生产嵌合体23

2.2.3 核移植25

3基因28

3.1 保存28

3.1.1 分离的染色体28

3.1.2 基因组DNA文库和/或cDNA文库的建立29

3.1.2.2 重组DNA的体外包装和转染36

3.1.2.1 高分子量基因组DNA的分离和部分水解36

3.1.3 基因分离39

3.1.4 核苷酸序列40

3.2 复原40

3.2.1 用保存的材料构建遗传文库40

3.2.2 转基因牛的生产41

3.2.2.1 直接显微注射DNA41

3.2.2.2 用逆转录病毒载体移植基因43

3.2.2.3 用转染的多能细胞形成嵌合体而生产转基因牛43

3.2.3 转基因动物的检查44

3.2.4 转基因牛的繁育48

4遗传问题51

4.1 小群体生存的可能性51

4.2 遗传变异性的降低51

4.3.1 在胚胎和精液文库中保存单基因54

4.3 质量性状54

4.3.2 在基因组文库中保存单基因55

4.4 数量性状56

5胚胎库的实际应用57

5.1 固定的胚胎移植站57

5.2 流动的胚胎移植小组57

5.3 供体母牛58

5.4 建立胚胎库所需要的费用61

6讨论和结果63

6.1 濒危的牛品种63

6.2 牛品种的保存价值63

6.3 选择最适宜的保种技术64

6.4 实际工作64

7 摘要66

8 参考文献67