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第一章基因工程实验室基本要求和常规仪器设备1

第一节 实验室安全和基本环境要求1

第二节 实验室常规仪器和设备7

第三节 实验室灭菌、消毒技术23

第二章核酸电泳技术29

第一节 核酸电泳的原理29

第二节 影响核酸电泳的因素32

第三节 核酸的检测方法37

第四节 核酸琼脂糖凝胶电泳41

第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳51

第三章核酸工具酶54

第一节 限制性核酸内切酶54

第二节 连接酶67

第三节 DNA聚合酶73

第四节 DNA修饰酶79

第五节 核酸酶80

第四章核酸的分离纯化84

第一节 核酸分离纯化的基本知识84

第二节 核酸分离纯化的基本原则91

第五章PCR的原理和应用102

第一节 PCR技术的原理102

第二节 PCR反应系统105

第三节 PCR常规技术及其延伸技术113

第四节 实时荧光定量PCR117

第六章基因工程常用载体125

第一节 基因工程载体的概述125

第二节 质粒载体128

第三节 λ噬菌体载体136

第四节 噬菌粒载体139

第五节 柯斯质粒载体140

第七章目的基因的克隆142

第一节 目的基因的克隆策略142

第二节 基因组文库的构建150

第三节 cDNA文库的构建154

第四节 核酸探针的制备162

第八章重组子的构建、转化和筛选167

第一节 连接方式167

第二节 重组子的构建策略171

第三节 重组子导入受体细胞178

第四节 重组子的筛选方法182

第九章大肠杆菌表达系统186

第一节 基因表达系统概述186

第二节 大肠杆菌表达系统的主要表达元件188

第三节 常见的大肠杆菌表达系统191

第四节 外源基因在大肠杆菌中表达的主要影响因素194

第十章酵母表达系统207

第一节 酵母表达系统的发展207

第二节 酵母的克隆载体类型209

第三节 酵母表达系统主要构成要素212

第四节 常用的酵母表达系统216

第五节 外源基因在酵母中表达的基本策略221

主要参考文献225

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