《表1 神经元、少突胶质细胞RT-PCR引物序列》

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《丹参注射液对胎鼠大脑皮质神经干细胞增殖和分化的影响》

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用TRIzol裂解细胞，提取细胞总RNA。使用Clontech逆转录试剂盒合成cDNA。通过荧光定量PCR，以GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）为内参检测Tuj1（Tubulin Beta 3 Class III）、Neuro D1（Neurogenic differentiation 1）、Syn1（Synapsin 1）、MAP2（microtubule associated protein 2）和MBP（Myelin Basic Protein）的相对表达量。荧光定量PCR反应所用引物序列见表1，反应体系为10μL，分别为2×master mix5μL、50×ROX 0.2μL、正向引物0.25μL（10μM）、反向引物0.25μL（10μM）、反转录产物4μL，无核酸酶水补齐至10μL；反应条件为50°C 10 min、95°C 30 s、60°C 34 s，经历40个循环，根据荧光定量PCR结果计算Tuj1、NeuroD1、Syn1、MAP2和MBP相对表达量。