《表1 基于可编辑核酸结合蛋白的各种病原体检测方法特性》

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《锌指蛋白结构域、转录激活效应蛋白和成簇规律间隔短回文重复技术检测病原体研究进展》

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注:ZFP:锌指蛋白结构域；TALE:转录激活效应蛋白；CRISPR:成簇规律间隔短回文重复；GFP:绿色荧光蛋白；PCR:聚合酶链式反应；RPA:重组酶聚合酶等温扩增技术

STAINS等[6]构建了启用序列重组（sequence-enabled reassembly，SEER）系统，将ZFP用于体外目标DNA检测。该系统是由一对ZFP（用于捕获DNA）与绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）或β-内酰胺酶（β-lactamase，β-Lac）融合组成。将靶DNA固定在板表面上，然后通过两个ZFP的结合，重组成二聚体报告蛋白，最后进行比色输出（表1）。此外，LEE等[7]构建了用于检测食源性致病菌大肠杆菌O157 DNA的一种与葡萄糖脱氢酶（glucose dehydrogenase，GDH）融合的ZFPs。通过将第一个ZFP固定在膜上，加入DNA样品，然后加入与报告分子结合的第二个ZFP进行检测。另外，LEE等[8]还开发了一种电化学检测系统，该系统使用甲基化CpG结合蛋白（methyl-CpG-binding domain，MBD）收集甲基化DNA，然后对收集到的甲基化DNA进行PCR扩增，最后用与GDH融合的ZFPs进行PCR产物检测，检测限为10 copies/m L（表1）。