《表1 引物序列：PCR结合核酸斑点杂交检测猪伪狂犬病毒》

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《PCR结合核酸斑点杂交检测猪伪狂犬病毒》

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根据NCBI上已经发表的PRV的gE基因核酸序列，分别设计和合成了两对引物。以SDTA2016毒株的DNA为模板，用引物PRV-F2/PRV-R2（表1）扩增，构建重组质粒，命名为PRV-gE。以质粒PRV-gE为模板，利用引物PRV-F1/PRV-R1（表1），按照PCR DIG Probe Synthesis Kit（Roche，USA）试剂盒说明书标记PRV的gE基因DIG标记核酸探针。标记的gE基因核酸探针经凝胶回收纯化后进行定量，-80℃保存备用。同时引物PRV-F2/PRV-R2也用于样品组织DNA的常规PCR检测。引物由上海生工生物工程有限公司合成。