《表2 各基因PCR反应条件》

《表2 各基因PCR反应条件》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《一株耐盐对硝基苯酚降解菌的分离及其降解机理研究》


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使用细菌基因组小提试剂盒(TaKaRa)提取目标菌株的基因组并用于16S rRNA基因扩增,所使用的16S rRNA基因扩增通用引物27F和1492 R引物序列如表1所示,PCR反应条件如表2所示。使用切胶回收试剂盒对PCR产物进行回收,将回收产物连接至pMD19-T载体后转入E.coli DH5α感受态细胞,并通过蓝白斑筛选阳性克隆;对获得的阳性克隆进行质粒提取(质粒小提试剂盒),提取后的质粒送英潍捷基进行测序;测序结果进行BLAST分析并构建系统发育树,使用MEGA 7.0进行系统发育树构建,采用NJ法进行发育树的构建(Bootstrap值为1 000)[12]。