《表2 扩增基因的PCR反应条件》

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《产ESBLs肺炎克雷伯菌ESBLs基因与可移动遗传元件相关性分析》

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根据NCBI中已发布的目的基因序列设计合成引物，见表1。在细菌扩大培养的LB液体培养基中未加细菌，培养条件及DNA提取过程均同Kpn标本，得到的液体则作为阴性对照。采用PCR法检测目的基因，其反应体系为:dd H2O 9.5μL、模板DNA 1μL、10μmol/L的上、下游引物各1μL、Premix Taq酶12.5μL，总体积为25μL，基因的扩增条件见表2。基因扩增产物在2.0%琼脂凝胶中150V电泳30min后于凝胶成像仪下观察并保存结果。随机抽取每个目的基因PCR阳性产物3株进行测序，测序结果作Blast比对。