《表2 CBH2引物设计：秸秆饲料化全细胞纤维素酶的构建及应用》

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《秸秆饲料化全细胞纤维素酶的构建及应用》

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根据CBH2基因序列设计一对引物Cbh2f (5′AATTACGTATTTGCTTTGATTGTTTTTGC3′，下划线为Sna BⅠ酶切位点）和Cbh2r (5′TAACCTGAG-GCTAATAAGTGCTATCAATCG 3′，下划线为Eco81Ⅰ酶切位点），以pPIC9K-CBH2为模板，PCR扩增得到目的基因CBH2（表2）。将原始质粒368-PGK用Sna BⅠ和Eco81Ⅰ两个限制性内切酶进行酶切，暴露出载体上两端黏性末端。将PCR扩增得到的CBH2同样用Sna BⅠ和Eco81Ⅰ酶切后回收。