《表2 基于拉曼光谱的PLS-DA模型鉴别结果》

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《基于拉曼光谱和自荧光光谱的柑橘黄龙病快速检测方法》

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健康样本和黄龙病样本之间的拉曼谱图也显示出显著的差异，即拉曼峰值强度，拉曼峰值位置和光谱带宽，特别在920～1100cm-1，1150～1250cm-1，1400～1700cm-1这三个主要包含碳水化合物、氨基酸、蛋白质和脂质相关信息的波数范围内拉曼光谱变化尤为显著。黄龙病样本在1257cm-1，1396cm-1 (CH振动），1446cm-1 (CH2弯曲、拉伸（蛋白质和脂质）），1601～1622cm-1 (C=C伸缩（酪氨酸和色氨酸））具有更大的拉曼峰值强度和光谱带宽，但是在1006cm-1 (C-C拉伸），1160cm-1 (C-C伸缩/C=C伸缩（蛋白质，也包括类胡萝卜素）），1191cm-1（类胡萝卜素），1529cm-1（-C=C-（类胡萝卜素））[14，17]，相比健康样本，黄龙病样本的拉曼峰值较弱。有文献报导黄龙病影响植物激素的浓度和合成的变化，与碳水化合物代谢相关的基因的改变导致细胞中淀粉颗粒的积累，显症的叶片中类胡萝卜素的含量相对较低[18-20]，而类胡萝卜素标准品的特征拉曼峰正是1006cm-1、1160cm-1、1191cm-1和1529cm-1，这与本研究光谱检测结果一致。这些试验结果表明，不同组织类型中独特生物分子相对于总拉曼活性成分的百分比显著增加和减少，这些差异的存在表明拉曼光谱检测技术在柑橘黄龙病快速判别中的具有潜力。通过对拉曼光谱进行PLS-DA建模分析，可以得到潜变量得分图（图8）。由图8可见前三个潜变量（LV1，LV2，LV3）分别占拉曼光谱的方差信息为46.63%，13.22%，5.38%，总共对光谱信息的描述达到了65.23%。采用留一法内部交叉验证，对438个拉曼光谱建立PLS-DA分类模型，结果如表2所示。从表2中可见，220个黄龙病样本，通过拉曼光谱分类模型分类结果是214个黄龙病，6个健康，模型的真患病率是97.27%；218个健康样本，通过拉曼光谱分类模型分类结果是2个黄龙病和216个健康，模型的真健康率是99.08%，模型总的准确率为98.17%。