《表3 菌株列表:甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响》

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《甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响》

再次利用CRISPR/Cas9系统对大肠杆菌R2进行基因敲除,对筛选得到的转化子进行菌落PCR鉴定,出发菌株R2验证引物间的大小应为3 114 bp,而发生基因敲除和同源重组后的菌株,其验证引物间的大小应为1 200 bp,条带大小均与预期大小相符,结果如图4所示,说明靶基因被成功敲除,最终可获得菌株R4(所有重组菌株如表3所示)。

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