《表3 菌株列表：甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响》

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《甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响》

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再次利用CRISPR/Cas9系统对大肠杆菌R2进行基因敲除，对筛选得到的转化子进行菌落PCR鉴定，出发菌株R2验证引物间的大小应为3 114 bp，而发生基因敲除和同源重组后的菌株，其验证引物间的大小应为1 200 bp，条带大小均与预期大小相符，结果如图4所示，说明靶基因被成功敲除，最终可获得菌株R4（所有重组菌株如表3所示）。