《表1 Real-time PCR引物序列》

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用1 mL TRIzol提取细胞总RNA,设计GLUT4、PI3K、AKT、AMPK、PPARγmRNA和3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)引物(表1),按照Real time PCR试剂盒说明书进行逆转录为cDNA,PCR反应条件为95℃变性15 s,55℃退火20 s,72℃延伸20 s,共45个循环,反应结束后确认Real-Time PCR的扩增曲线和溶解曲线,以GAPDH为内参,计算mRNA相对表达量,进行均一化处理后,再进行统计分析,引物序列(表1)。