《表2 打靶载体转染梯度》

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《锌指核酸酶介导的陆川猪Fat1基因打靶载体构建及体外转基因研究》

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Plus：转染效率增强试剂；LTX：脂质体；下同

选择处于对数生长期状态良好的成纤维细胞，用0.25%胰酶消化细胞，血球计数板计数，加入新鲜的含10%胎牛血清的DMEM培养液，制成105/mL的细胞悬液，接种到12孔培养板，每孔加1 mL，于37℃、饱和湿度、5%CO2培养箱培养。待细胞长到70%～80%汇合时，用线性化的打靶载体质粒DNA按表2中1～5的梯度转染PKF，每个梯度做3个重复。