《表4 PCR反应的因素水平L9 (34) 正交实验设计表》

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《CYP2C19基因多态性PCR扩增体系的正交优化与验证》


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为确CYP2C19基因扩增条件中PCR Mix、Taq DNA聚合酶、循环数共3个影响因素(表3)的最佳水平,在不考察交互作用的前提下,采用正交设计L9(34)表在3个水平上(表4)进行优化。以阳性对照为模板DNA,量均为1.2μL,其余条件按照正交实验表,以无核酸纯水补充总体系至4μL。热循环条件:(1)42℃预热5 min;(2)94℃预变性3 min;(3)94℃变性30 s,60℃退火30 s,70℃延伸30 s,循环数根据实验设计而定;(4)最后72℃延伸3 min;(5)持续4℃保存PCR产物直至收取。