《表1 引物序列：围绝经期小鼠抑郁样行为及相关脑区GABA_A受体的改变》

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《围绝经期小鼠抑郁样行为及相关脑区GABA_A受体的改变》

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选择引物对温度（Tm）保持在50℃至65℃之间。

该实验过程在9∶00至12∶00之间进行。强迫游泳实验设备为两个有机玻璃圆柱桶（高25cm，直径15cm）。在进行强迫游泳测试之前，将所有小鼠置于测试室中30min。实验时在桶内注入15cm深度的水，水温（24±1）℃，将两只小鼠分别置于桶中游泳6 min。每次更换小鼠时更换水一次。通过视频跟踪系统（SMART 3.0）自动跟踪记录每只小鼠的行为。计算小鼠在6min内不动时间。以不动时间/总时间记为不动时间百分比，为统计指标。不动时间百分比越大，表示小鼠抑郁样行为越明显。1.2.3实时定量PCR在强迫游泳实验结束24h后通过颈椎脱臼法处死小鼠，剥离大脑，在冰盒内分离前额叶皮质、海马，在液氮中冷冻。使用RNAfast1000RNA提取试剂盒（先锋科技，中国）提取总RNA，采用ELx800Microplate Reader（BioTek，USA）进行RNA定量，采用反转录试剂盒（TaKaRa，日本）合成cDNA。使用SYBR Premix Ex TaqⅡ（TaKaRa，日本）在Bio-Rad iQ5系统（Bio-Rad，USA）上进行实时定量PCR，条件为:95℃30s；95℃10s，57℃30s和72℃30s，重复40个循环。Gapdh作为内参，相对表达水平用2-ΔΔCt法测定。引物序列如表1所示。