《表1 喹诺酮类药物耐药相关基因的引物信息[4-5]》

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《脲原体属和人型支原体体外药物敏感性及其对喹诺酮类药物耐药机制分析:单中心回顾性研究》


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UP:微小脲原体;UU:解脲脲原体

上述1.3中的77份标本中,7份标本量不足以完成耐药机制检测,故仅对剩余的70份标本提取核酸进行喹诺酮类药物耐药机制检测。基于Beeton等研究[4-5],针对Gyr A、Gyr B、ParC、ParE 4种酶的编码基因设计引物(表1)。采用普通PCR法扩增目的基因并测序,将DNA测序结果翻译成蛋白质序列,与NCBI数据库中解脲脲原体ATCC 33699(GenBank CP001184.1)以及微小脲原体血清型1 ATCC 27813(GenBank AF056983)、血清型3 ATCC 700970(GenBank AF222894)、血清型6 ATCC 27818(GenBank AF056984)、血清型14 ATCC33697(GenBank AF056982)的参考菌株序列进行比对,寻找耐药相关突变位点。