《表1 RT-PCR引物》

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《仔猪神经干细胞体外培养及鉴定》


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选择第4代和第8代神经干细胞,Trizol一步法提取细胞总RNA;利用紫外分光光度计检测RNA质量;利用反转录酶(TaKaRa公司)合成第一链cDNA;基因特异性引物PCR扩增目标基因。特异性引物由上海生工设计并合成。引物包含内含子区域,避免错误扩增。PCR循环条件为:94℃5 min;94℃30 s,60℃30 s,72℃40 s,30个循环;72℃,5 min。PCR片段长度200~300 bp,见表1。