《表1 引物序列：重组人粒细胞集落刺激因子增加急性髓性白血病细胞对三氧化二砷的敏感性及其机制探讨》

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《重组人粒细胞集落刺激因子增加急性髓性白血病细胞对三氧化二砷的敏感性及其机制探讨》

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HL-60及THP-1细胞根据加药情况分为2组，即对照组（不做任何处理）及rhG-CSF处理组（100 ng/mL rhG-CSF作用24或48 h）。NB4细胞仅设对照组。用实时荧光定量PCR法检测AQP9在不同细胞中的基础表达水平以及rhG-CSF（100 ng/mL）作用于HL-60、THP-1细胞前后AQP9 mRNA表达水平的改变。收集各组细胞（5×105个），用TRIzol法提取细胞总RNA，Nanodrop测定所提取RNA的浓度和纯度。各组取1μg总RNA样本，经iScript cDNA试剂盒反转录为cDNA，用于后续实时荧光定量PCR检测，引物序列见表1[引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成]。PCR反应体系为10μL，按TaKaRa公司提供的说明书进行配制。PCR扩增条件为95℃预变性30 s，95℃10 s、60℃30 s，共40个循环。每个样品设置3个复孔，以2-ΔΔCt值表示目的基因的相对表达水平。