《表1 PCR引物序列及大小》

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《冷冻保存新生牛睾丸组织中支持细胞的分离纯化》


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消化收集106个细胞于离心管中,PBS离心洗涤3次,用TRIzol Reagent常规提取细胞总RNA于-80℃保存备用。将细胞总RNA用反转录试剂盒反转为cDNA。PCR反应体系为:rTaq酶12.5μL,cDNA 1μL,上、下游引物(10μmol/L)各0.5μL,ddH2O 10.5μL。PCR反应条件为:95℃5 min;95℃30s;60℃30s;72℃30s;72℃延伸5min,共45个循环,用1%琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定(表1)。