《表2 模板浓度梯度扩增CT值及扩增效率计算结果》

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《珠子参实时荧光定量PCR体系的建立与优化》


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注:k=En/E5,其中En表示第n个实验组的扩增效率,E5表示第5个实验组的扩增效率。

超微量紫外分光光度计测量珠子参总cDNA浓度,依次稀释为120 ng/μL、24 ng/μL、4.8 ng/μL、0.96 ng/μL、0.192 ng/μL共5个浓度梯度,保证扩增条件相同,并且保证其他试剂用量也相同,进行real-time PCR反应,并设置阴性对照1例,每一组做三个重复实验,对cDNA模板浓度进行优化检测,结果如图3所示,图中ΔRn是荧光值Rn扣除基线后的标准化结果,各实验组的CT值如表2所示。