《表1 中华鳖MyoD1基因扩增引物》

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《中华鳖MyoD1基因SNP鉴定及其与生长性状的关联分析》

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注:F.正向引物；R.反向引物

根据NCBI数据库中登录的中华鳖MyoD1基因序列（GenBank登录号:NW＿005858157.1）设计4对引物（表1），以中华鳖基因组DNA为模板，采用PCR技术分别扩增MyoD1基因的各个片段。PCR扩增反应总体积为20.0μL，PCR反应体系包括10.0μL 2×Taq PCR master mix、上下游引物（20μmol/L）各0.5μL、模板DNA 0.5μL，加dd H2O至20.0μL。PCR反应程序:94℃预变性10 min；94℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，共进行35个循环；72℃延伸10 min，4℃保存。将PCR产物进行1.2%琼脂糖凝胶电泳检测。PCR产物纯化后送至生工生物工程有限公司测序。测序结果用BioEdit软件进行序列比对分析，获得SNP位点。