《表3 SSR扩增位点引物》

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《杉木木材形成功能基因内SSR标记的开发及应用》

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根据SSR位点两侧保守序列，共设计了14对SSR扩增引物（表3），其中CLSSR3位点无法设计引物。为了检测所设计的引物的有效性，以来源于不同地理种源的12个杉木无性系为材料，进行PCR扩增及等位位点多样性检测（图2），发现14对SSR引物皆能得到有效扩增；其中7对能够在这12个无性系间扩增出具多态性的产物，共检测到18个等位变异，每对引物组合可检测到2~4个等位变异，平均每对引物产生2.571 4个。这表明本次从杉木木材形成功能基因内检测到的SSR位点在所检测的不同基因型间具有较高的多样性。进一步对具多态性的PCR产物进行克隆测序，图3显示了杉木NAC（NAM，ATAF1/ATAF2，CUC2）转录因子基因1（ClNAC1）3'UTR的GATT为重复单元SSR位点的多样性。测序数据与毛细管电泳结果一致，表明本次实验开发的SSR引物有效，可用于杉木的分子遗传多样性分析。