《表2 部分红色荧光蛋白特性[39]》

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《基于光学成像的益生菌体内示踪技术》

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自1962年，Shimomura等人[29]首次从水母体中克隆出绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）.针对不同应用，通过对分离蛋白进行改造，研究人员现已研究出青色、橙色、红色等多种颜色荧光蛋白，如通过对绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白（DsRed）进行突变，分别得到了发光性更好且更稳定的EGFP（enhanced green fluorescent protein）[30]，UKG[31]，Emerald[32]，Superfolder[33]等绿色荧光蛋白和mRuby[34]，mCherry[35]，TagRFP 158T[36]，TagRFP[37]等红色荧光蛋白.由于光穿透组织的能力主要取决于光的波长，波长越长，穿透组织的效果越好（波长>650 nm），在体内成像中，应用发射红色光谱的荧光分子效果更好[38]（表2）.荧光蛋白作为标记物，需要激发光才能使荧光基因达到较高的能量水平，然后发射出较长波长的发射光，此反应的背景光较强，但是发光强且稳定，不需要底物或其他条件的共同作用[39，40]，在体内成像应用中较广泛.荧光蛋白的表达不影响益生菌的生长及在动物体内的转移和定殖，对研究益生菌的功能特性具有重要意义.